p Em um artigo publicado em Pequena , pesquisadores aplicaram com sucesso um novo método qualitativo e quantitativo para a detecção de uma sequência de DNA característica do cinetoplasto de Leishmania infantum, um parasita frequente em veterinária que também afeta humanos. p Superando a técnica clássica de PCR

p A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é o método padrão atual para identificar a presença de uma sequência de DNA específica em uma amostra. O PCR usa enzimas e dois primers, fitas de sequências curtas de ácido nucleico que servem como ponto de partida para a cópia do DNA. Quando a detecção é positiva, esta técnica produz milhões de cópias da sequência do problema para facilitar sua detecção. Esta amplificação de DNA envolve mudanças térmicas precisas (termociclagem) e equipamentos sofisticados e caros, que são superados por uma abordagem alternativa chamada de amplificação isotérmica, realizado a temperatura constante.

p Os autores do artigo apresentam um novo projeto de amplificação isotérmica usando primers marcados com nanopartículas de ouro e microesferas magnéticas. O produto amplificado carrega ambos os rótulos permitindo uma purificação e quantificação rápidas. As propriedades magnéticas do primeiro primer facilitam a purificação / pré-concentração do DNA amplificado por meio de métodos de separação magnética. Por outro lado, as nanopartículas de ouro são facilmente quantificadas por métodos simples de detecção eletrocatalítica. Assim, o uso de primers marcados com nanopartículas de ouro e microesferas magnéticas torna a amplificação isotérmica um método de diagnóstico qualitativo e quantitativo mais rápido e fácil.

p Nanopartículas para detecção de Leishmania e outros testes de ponto de atendimento

p Esta abordagem foi aplicada com sucesso para a detecção de uma sequência de DNA característica do cinetoplasto de Leishmania infantum, um parasita responsável por uma doença em cães domésticos, canídeos selvagens e humanos. O método eletroquímico exibiu boa reprodutibilidade e sensibilidade. Além disso, DNA amplificado de cães sem Leishmania foi perfeitamente discriminado, demonstrando a especificidade do procedimento de amplificação e da detecção eletroquímica. Na verdade, o desempenho da abordagem proposta é melhor do que o obtido com outros testes point-of-care para detecção de Leishmania, oferecendo também uma ferramenta quantitativa para a determinação de parasitas. Este método representa uma metodologia universal que pode ser aplicada a qualquer projeto de amplificação isotérmica de DNA.