Por Carla Boulianne Atualizado em 24 de março de 2022

As soluções tampão resistem às mudanças de pH porque contêm conjugados ácido-base fracos que neutralizam os íons H+ e OH-. As soluções tampão consistem em ácidos ou bases fracas e no sal desse ácido ou base. A seleção de um sistema tampão apropriado depende da faixa de pH para tamponamento. A maioria das reações biológicas ocorre em uma faixa de pH de 6 a 8. Os tampões de fosfato tamponam na faixa de pH de 6,5 a 7,5. Os tampões de ácido carboxílico são úteis em pH 3 a 6. Os tampões de borato funcionam em pH 8,5 a 10. Os tampões de aminoácidos, como glicina e histidina, atuam em uma diversidade de faixas de pH. O tampão Tris é um dos sistemas tampão mais comumente usados ​​em laboratórios de biologia. Os cálculos para uma solução tampão Tris serão usados ​​no exemplo a seguir, mas a metodologia se aplica a qualquer solução tampão.

Etapa 1

Use o produto da molaridade e do volume da solução final para determinar os moles de base necessários. Por exemplo, se forem necessários 2 litros de uma solução 0,1 M de tampão Tris, então o número de moles de Tris necessários é:

0,1 moles/litro x 2 litros =0,2 moles Tris base

Etapa 2

Calcule a massa de tampão necessária multiplicando o número de moles necessários pelo peso molecular da base. Por exemplo, a massa de 0,2 moles de base Tris é igual a:

0,2 moles de Tris x 121,1 g/mol de Tris =24,22 g de Tris

Etapa 3

Meça a massa apropriada da base em uma balança.

Etapa 4

Dissolva a base em água destilada usando uma barra de agitação magnética e uma placa quente de agitação. Dissolva-o em um volume de água apenas um pouco menor que o volume da solução final (950 a 975 mL para cada litro de solução final). O pH do tampão Tris muda com a concentração e necessita de reajuste se for utilizado um volume inicial muito pequeno. Também é melhor preparar o tampão na mesma temperatura em que será usado durante o ensaio ou experimento, pois o Tris tem grandes alterações de pH dependentes da temperatura.

Etapa 5

Titule a solução aquosa de Tris com ácido clorídrico 1 M usando um medidor de pH.

Etapa 6

Levar a solução ao volume final com água destilada em balão volumétrico.

Coisas necessárias

• Água destilada
• Base em pó ou cristal
• Ácido clorídrico (HCl)
• Cilindro graduado
• Balão volumétrico
• Barra de agitação magnética
• Placa quente para mexer
• Medidor de pH com sonda
• Escala
• Calculadora

TL;DR (muito longo; não li)

Para economizar tempo ao preparar uma solução tampão, você pode usar concentrados tampão pré-fabricados no pH necessário e diluir até a molaridade e o volume desejados.

Prepare a solução tampão na mesma temperatura em que será usada para evitar alterações significativas de pH.

Evite ajustes de pH demorados, titule somente após diluir até a concentração desejada. A dissolução em um volume muito pequeno levará a titulações repetidas.

Aviso

Tenha cuidado ao manusear ácidos e bases.

Use óculos de proteção.