Você está observando um fenômeno comum com tampões de fosfato. Eis por que seu tampão fosfato provavelmente se tornou cristalino na geladeira:

Solubilidade e temperatura:

* sais de fosfato são menos solúveis em temperaturas mais baixas. Quando você armazena seu buffer na geladeira, a temperatura mais fria faz com que a solubilidade dos sais de fosfato diminua.
* Cristalização: À medida que a solubilidade diminui, os íons fosfato não podem mais permanecer totalmente dissolvidos na solução. Eles começam a sair da solução e formam cristais.

Outros fatores:

* Concentração de buffer: Os tampões de fosfato mais concentrados são mais propensos à cristalização, porque há uma concentração mais alta de íons fosfato que podem sair da solução.
* Sais específicos: Diferentes sais de fosfato têm solubilidades diferentes. Por exemplo, o fosfato de sódio dibásico (Na2Hpo4) é geralmente mais solúvel que o fosfato de sódio monobásico (Nah2po4).
* ph: O pH do tampão também pode influenciar a solubilidade.

Como evitar a cristalização:

* menor concentração: Use uma menor concentração de sais de fosfato, se possível.
* aquecer antes do uso: Antes de usar o tampão, aqueça -o à temperatura ambiente para aumentar a solubilidade dos sais de fosfato.
* Use um sistema buffer diferente: Se você precisar de um buffer a pH 8,5 que seja menos propenso à cristalização, considere usar um sistema de buffer diferente como Tris ou Hepes.

Nota importante: Se você vir cristais em seu buffer, é melhor descartá -lo. Embora o buffer ainda possa estar funcional após a dissolução dos cristais, sua presença pode indicar um problema em potencial com a estabilidade do buffer.