Os pesquisadores validam a viabilidade clínica para o teste COVID-19 baseado em CRISPR no local de atendimento
p Micrografia eletrônica de varredura colorida do vírus SARS-CoV-2. Crédito:NIAID
p Em março, pesquisadores do Departamento de Engenharia Biomédica - um departamento compartilhado nas escolas de Medicina Dentária, Medicina, e Engenharia - começou a desenvolver um novo, baixo custo, Plataforma de diagnóstico baseada em CRISPR para detectar doenças infecciosas, incluindo o vírus HIV, o novo coronavírus (SARS-CoV-2). Hoje, o método está um passo mais perto de ser uma tecnologia de diagnóstico de ponta para detecção rápida de doenças infecciosas. p Liderado pelo professor associado Changchun Liu, o método "All-In-One-Dual CRISPR-Cas12a" (AIOD-CRISPR) permite simples, rápido, ultrassensível, detecção visual de SARS-CoV-2, destinado ao uso em casa ou em pequenas clínicas.
p Em um artigo publicado em
Nature Communications , os pesquisadores validaram a viabilidade clínica da plataforma usando amostras de esfregaço clínico COVID-19. Adicionalmente, os pesquisadores usaram um aquecedor de mãos de baixo custo como incubadora para detectar resultados de amostras clínicas em 20 minutos.
p "O uso de aquecedores de mãos descartáveis para aquecer o ensaio AIOD-CRISPR elimina a necessidade de equipamentos elétricos caros, permitindo diagnósticos moleculares de ponto de atendimento sem instrumento de COVID-19, "diz Liu.
p A publicação foi co-autora dos pesquisadores de pós-doutorado Xiong Ding e Kun Yin; Ph.D. estudante Ziyue Li; professor e reitor associado de pesquisa, Dr. Rajesh Lalla; Dr. Enrique Ballesteros, professor associado e presidente, patologia e medicina laboratorial; e Dr. Maroun Sfeir, professor assistente de patologia e medicina laboratorial.
p O teste de amplificação de ácido nucleico (PCR / RT-PCR) é atualmente o método mais sensível e específico para a detecção precoce de patógenos, mas não é adequado para diagnósticos rápidos no local de atendimento devido à necessidade de equipamento de laboratório especializado e técnicos treinados. Patógenos altamente contagiosos, Contudo, precisam de monitoramento em tempo real para evitar a propagação de pessoa para pessoa.
p No estudo, Liu e sua equipe avaliaram seu método AIOD-CRISPR usando o extrato de RNA de 28 amostras clínicas de esfregaço COVID-19, que incluiu oito amostras positivas para COVID-19. Para garantir a confiabilidade da detecção, cada amostra foi testada duas vezes em dois ensaios independentes. Todas as oito amostras positivas de COVID-19 foram identificadas como positivas em 40 minutos, o que também foi confirmado por detecção visual. Os resultados também foram consistentes com os do método RT-PCR aprovado pelo CDC.
p Os pesquisadores também usaram um aquecedor de mãos de baixo custo como incubadora para detectar as amostras dos pacientes e eliminar a necessidade de uma incubadora elétrica. Os tubos AIOD-CRISPR foram colocados diretamente em um aquecedor de mãos ativado a ar, e os resultados eram visíveis a olho nu sob luz LED. Duas amostras COVID-19 positivas incubadas no saco aquecedor de mãos foram detectadas visualmente e identificadas como positivas em 20 minutos.
p "Tão simples, A plataforma de detecção portátil e sensível tem o potencial de fornecer um diagnóstico rápido e precoce de COVID-19 e outras doenças infecciosas em casa, no consultório médico, e até mesmo em sites de teste drive-thru, "diz Liu.