Os cientistas usam uma variedade de ferramentas e técnicas para observar a estrutura detalhada das células. Aqui está um detalhamento dos métodos mais comuns:
1. Microscopia: *
Microscopia de luz (LM): Esta é a forma mais básica de microscopia. Ele usa luz visível para iluminar e ampliar a amostra.
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Microscopia de campo brilhante: O tipo mais comum, produz uma imagem em que o espécime está escuro contra um fundo brilhante.
* Microscopia de contraste de fase: Essa técnica aprimora o contraste das amostras transparentes, explorando as diferenças no índice de refração.
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Microscopia de contraste de interferência diferencial (DIC): Esta técnica usa luz polarizada para criar uma imagem do tipo 3D com contraste aprimorado.
* Microscopia de fluorescência
: Essa técnica usa corantes fluorescentes que se ligam a componentes celulares específicos, permitindo a visualização desses componentes.
* Microscopia eletrônica (EM): Esse tipo de microscopia usa elétrons para iluminar a amostra, fornecendo uma resolução muito maior que a microscopia de luz. Isso permite a visualização de estruturas no nível do nanômetro.
* Microscopia eletrônica de transmissão (TEM): Um feixe de elétrons é passado através da amostra, criando uma imagem 2D das estruturas internas.
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Microscopia eletrônica de varredura (SEM): Um feixe de elétrons é digitalizado na superfície da amostra, criando uma imagem 3D da superfície.
2. Técnicas de coloração: *
coloração envolve o uso de corantes para colorir componentes celulares específicos, tornando -os visíveis sob um microscópio. Algumas manchas comuns incluem:
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Hematoxilina e eosina (H&E) Coloração: Uma mancha histológica comum usada para visualizar os núcleos e o citoplasma das células.
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coloração de grama: Usado para diferenciar bactérias com base na estrutura da parede celular.
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coloração de imunofluorescência: Usa anticorpos fluorescentes que se ligam a proteínas ou moléculas específicas dentro da célula.
3. Fracionamento celular: * Esse processo envolve quebrar células abertas e separar seus componentes com base no tamanho e na densidade. Isso é alcançado por:
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centrifugação: Gira uma amostra em alta velocidade, separando diferentes componentes em camadas.
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Centrifugação diferencial: Usa velocidades diferentes para isolar organelas específicas.
4. Técnicas moleculares: *
imunocitoquímica: Usa anticorpos para detectar proteínas específicas nas células.
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hibridização in situ: Usa sondas de DNA ou RNA marcadas para detectar sequências específicas nas células.
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Técnicas de edição de genes: Permitir a manipulação de genes específicos nas células, permitindo que os cientistas estudem a função desses genes.
5. Outras técnicas: * Cristalografia de raios X: Usado para determinar a estrutura 3D das proteínas e outras moléculas.
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microscopia crio-eletrônica (crio-EM): Uma forma especializada de microscopia eletrônica que permite a visualização de estruturas em resolução quase atômica.
Escolhendo a técnica correta: A escolha da técnica depende do tipo de célula específico, das estruturas a serem observadas e do nível de detalhe desejado. Por exemplo, a microscopia de luz pode ser suficiente para visualizar a estrutura geral de uma célula, enquanto a microscopia eletrônica é necessária para visualizar a estrutura detalhada das organelas.
Nota: Cada técnica tem suas próprias limitações e vantagens. Os pesquisadores geralmente combinam várias técnicas para obter uma compreensão abrangente da estrutura e função celular.