Um cientista quer observar a estrutura que se une a uma célula vizinha. Como deve ser detalhado a célula?
Aqui está um detalhamento de como um cientista pode observar a estrutura que unindo células (junções celulares) em detalhes, juntamente com as técnicas que eles podem usar:
Técnicas para observar junções celulares * Microscopia de luz:
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Microscopia de campo brilhante: Embora não seja a microscopia de campo brilhante mais detalhado, pode fornecer uma visão básica do formato da célula e como as células são conectadas.
* Microscopia de contraste de fase: Essa técnica aprimora o contraste dentro da célula, facilitando a visão dos contornos das junções celulares.
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Microscopia de contraste de interferência diferencial (DIC): A DIC produz uma imagem tridimensional e quase holográfica, melhorando a visualização das junções celulares.
* Microscopia eletrônica (EM): Para detalhes ultraestruturais:
* Microscopia eletrônica de transmissão (TEM): O TEM fornece imagens incrivelmente de alta resolução. Seções finas de células são coradas com metais pesados, e os elétrons que passam revelam a arquitetura detalhada das junções celulares.
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Microscopia eletrônica de varredura (SEM): O SEM cria uma imagem 3D da superfície da célula, mostrando a morfologia das junções celulares com mais detalhes.
Preparativos específicos para estudar junções celulares: *
Cultura de células: Os cientistas costumam usar células cultivadas (cultivadas em um laboratório) para estudar junções celulares. As células cultivadas são mais fáceis de manipular e observar do que as células nos tecidos.
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Preparação de tecidos: *
Fixação: Células e tecidos são tratados quimicamente (fixos) para preservar sua estrutura e impedir a degradação.
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Incorporação: O tecido fixo é incorporado em um meio sólido, como cera ou resina para suporte durante o corte.
* Seção
: As fatias finas do tecido incorporado são cortadas usando um microtomo, criando seções finas o suficiente para microscopia de luz ou eletrônica.
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coloração: Corantes e manchas específicos são usados para destacar diferentes estruturas e componentes celulares, tornando as junções celulares mais visíveis.
Tipos de junções celulares para observar: *
Junções apertadas: Essas junções formam uma vedação apertada entre as células, impedindo a passagem de fluidos e moléculas entre elas.
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aderências às junções: Essas junções fornecem forte adesão entre as células, agindo como uma "cola". Eles envolvem proteínas como caderinas que se ligam às células.
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desmossomos: Semelhante às junções aderentes, os desmossomas fornecem forte adesão, mas são estruturas semelhantes ao ponto que conectam os filamentos intermediários das células adjacentes.
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Junções de gap: Essas junções atuam como canais que permitem comunicação direta entre células, íons de passagem e pequenas moléculas.
Considerações importantes: *
Especificidade: Os cientistas podem usar anticorpos que se ligam especificamente a proteínas encontradas nas junções celulares. Isso permite a coloração direcionada e a visualização de tipos específicos de junções.
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Preparação da amostra: A preparação adequada das células ou tecidos é crucial para garantir a integridade das junções celulares e obter imagens de alta qualidade.
Exemplo Experimento: Um cientista quer estudar como as junções apertadas no revestimento intestinal são afetadas por um medicamento específico. Eles podem:
1.
cultivar células epiteliais intestinais em cultura. 2.
Trate algumas células com o medicamento e outras com uma solução de controle. 3.
consertar e preparar as células para microscopia eletrônica. 4.
Analise as imagens para comparar a estrutura de junções apertadas nas células tratadas e não tratadas. Ao combinar técnicas e análises apropriadas, os cientistas podem obter informações valiosas sobre a estrutura e a função das junções celulares, essenciais para a organização e comunicação teciduais.