Uma equipe de pesquisa liderada pelo Prof. Chen Yan do Instituto de Tecnologia Avançada de Shenzhen (SIAT), Academia Chinesa de Ciências, e seus colaboradores desenvolveram uma nova técnica de citometria de fluxo microfluídica digital, chamada Nano-DMFC, para análise in situ de múltiplos miRNAs em células tumorais circulantes únicas (CTCs).
O estudo foi publicado em Pequeno em 14 de julho.

Em estudos de biópsia líquida, as estratégias de detecção de CTCs baseadas em marcadores epiteliais de superfície são amplamente utilizadas. No entanto, eles sofrem de baixa especificidade na distinção entre CTCs e células epiteliais em populações de células hematopoiéticas.

Os miRNAs associados a tumores dentro dos CTCs estão surgindo como novos biomarcadores devido à sua alta correlação com o desenvolvimento e progresso do tumor. Mas ainda é um desafio realizar análises in-situ de vários miRNAs de CTCs vivos únicos atualmente.

Neste estudo, o novo nanomaterial bidimensional, metal organic framework (MOF), forneceu novas ideias para sondas de células vivas devido à sua estrutura controlável e diversas funções.

No Nano-DMFC, os pesquisadores integraram um novo nanosensor 2D MOF em um citômetro de fluxo microfluídico de gotículas, obtendo análise in situ, multiplex e quantitativa de miRNAs em CTCs vivos únicos com alto rendimento. Eles estabeleceram os nanosensores de transferência de energia de ressonância fluorescente baseados em MOF 2D conjugando sondas de DNA marcadas com corante de fluorescência de duas cores em uma superfície de nanofolha MOF.

O Nano-DMFC consiste em três componentes:um gerador de gotículas de célula única, uma unidade de microinjeção nanoprobe e uma unidade de detecção de fluorescência de gotículas. As nanossondas 2D baseadas em MOF foram microinjetadas com precisão em cada gotícula encapsulada de célula única para obter a caracterização dupla de miRNA em uma única célula cancerosa.

Esta plataforma Nano-DMFC detectou miRNAs duplos em resolução de célula única em 10 células MCF-7 positivas mistas (uma linhagem de células de câncer de mama) de 10.000 células epiteliais negativas em amostras biomímicas de soro.

"Nossa plataforma de Nano-DMFC proposta mostra boa reprodutividade no experimento de recuperação de amostras de sangue enriquecidas, o que demonstrou o alto potencial para diagnóstico precoce e prognóstico de câncer baseado em CTC", disse o Prof. Chen Yan. + Explorar mais

Novo método para detectar células tumorais com alta especificidade e sensibilidade