p Fig. Diagrama de fluxo de trabalho do sistema de detecção nano-dLAMP. Crédito:SIBET
p Uma equipe conjunta da China forneceu recentemente um multiplexação, método de detecção quantitativa para o diagnóstico precoce e terapia direcionada de neoplasias mieloproliferativas, um tipo de tumor hematológico crônico que é acompanhado por insuficiência da medula óssea ou leucemia. p O time, liderado por Zhou Lianqun do Instituto de Engenharia Biomédica e Tecnologia de Suzhou da Academia Chinesa de Ciências e GUAN Ming do Hospital Huashan, estabeleceu uma plataforma de amplificação isotérmica mediada por loop digital assistida por nanopartículas (nano-dLAMP) para a análise de neoplasias mieloproliferativas.
p Reação em cadeia da polimerase digital (PCR digital, dPCR), uma alta sensibilidade, tecnologia de detecção de ácido nucleico quantitativa absoluta e de alta tolerância, desempenha um papel importante em uma variedade de campos de aplicação, como detecção de mutações raras, variação do número de cópias, biópsia líquida, análise de célula única, detecção geneticamente modificada, teste de carga viral, e análises quantitativas microbiológicas.
p Neste estudo, os pesquisadores fabricaram chips de microarray com quatro partições físicas para a detecção simultânea de calreticulina tipo 1, calreticulina tipo 2, Janus quinase 2 V617F mutações e um gene de referência interno.
p Eles então usaram aditivos de PCR e nanopartículas para fazer a amplificação isotérmica mediada por loop tradicional (LAMP) adequada para amplificação em escala de nanolitro.
p Os resultados sugeriram que as nanopartículas poderiam melhorar o desempenho de amplificação do nanolitro LAMP.
p A detecção quantitativa dos principais marcadores moleculares de neoplasias mieloproliferativas pode ser realizada simultaneamente em um chip de microarray de quatro partições em uma hora. O acordo entre a plataforma desenvolvida e o comercial Quantstudio 3D foi de 99%.
p Este exato, rápido, multiplex, e uma plataforma nano-dLAMP barata pode ser uma ferramenta promissora para o diagnóstico clínico no futuro, de acordo com os pesquisadores.
p Os resultados do estudo foram publicados em Sensors &Actuators B:Chemical intitulado "Establishment of Scalable Nanoliter Digital LAMP Technology for the Quantitative Detection of Multiple Myeloproliferative neoplasm molecular markers."
p O grupo de Zhou tem se concentrado no campo de biossensores por mais de 10 anos, e acumulou uma base sólida no desenvolvimento de métodos de biossensores, projeto e processamento do biochip, e desenvolvimento de instrumentos de biociência.
p Na pesquisa e desenvolvimento de PCR digital, método dPCR baseado em chip (cdPCR) com alta estabilidade de isolamento, boa uniformidade de temperatura e velocidade de detecção rápida foi desenvolvida. Uma série de progressos foram obtidos no método de detecção, lasca, reagente e instrumento de cdPCR.