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  • A ferramenta de transfecção de célula única permite um controle adicional para estudos biológicos

    Transfecção do corante dextrano Alexa Fluor 488 em uma célula HeLa alvo usando Nanofountain Probe Electroporation. Reproduzido com permissão da Nano Letters. Copyright 2013 American Chemical Society.

    (Phys.org) - Pesquisadores da Northwestern University desenvolveram um novo método para entregar moléculas em unidades, células-alvo através de orifícios temporários na superfície da célula. A técnica pode encontrar aplicações na entrega de drogas, terapia celular, e campos biológicos relacionados.

    A eletroporação em massa - uma técnica usada para entregar moléculas nas células por meio de nanoporos reversíveis na membrana celular que são causados ​​por sua exposição a pulsos elétricos - é um método cada vez mais popular de transfecção celular. (A transfecção celular é a introdução de moléculas, tais como ácidos nucleicos ou proteínas, em uma célula para alterar suas propriedades.)

    Contudo, porque a eletroporação em massa aplica pulsos elétricos a uma solução de célula em massa, isso resulta em populações de células heterogêneas e freqüentemente baixa viabilidade celular. Para resolver esses problemas, Os pesquisadores da Northwestern University desenvolveram uma nova ferramenta para a transfecção de uma única célula.

    O novo método, chamada de eletroporação de sonda nanofountain (NFP-E), permite que os pesquisadores entreguem moléculas em células-alvo por meio de nanoporos temporários na membrana celular criados por um campo elétrico localizado aplicado a uma pequena porção da célula. O método permite aos pesquisadores controlar a dosagem variando a duração dos pulsos elétricos, que fornece controle sem precedentes da transfecção celular.

    "Isso é realmente emocionante, "disse Horacio Espinosa, James e Nancy Farley Professor de Manufatura e Empreendedorismo na McCormick School of Engineering da Northwestern e um dos autores do artigo. "A capacidade de entregar moléculas com precisão em células individuais é necessária para que os pesquisadores de biotecnologia avancem o estado da arte em terapêutica, diagnósticos, e entrega de medicamentos para a promessa de medicina personalizada. "

    Um artigo que descreve a pesquisa, "Nanofountain Probe Electroporation (NFP-E) de células individuais, "foi publicado em 7 de maio na revista Nano Letras .

    O NFP-E é baseado na tecnologia de sonda nanofountain (NFP) desenvolvida no laboratório de Espinosa. O chip NFP-E consiste em uma série de sondas cantilever microfabricadas com canais microfluídicos integrados. A sonda já foi usada para nanopatterning de alta velocidade de proteínas e nanopartículas para estudos de entrega de drogas.

    O novo aplicativo de transfecção de célula única acopla a sonda a um eletrodo e sistema de controle de fluido que pode ser facilmente conectado a um micromanipulador ou microscópio de força atômica para controle de posição. Este sistema integrado permite que todo o processo de transfecção e a resposta celular pós-transfecção sejam monitorados por um microscópio óptico.

    O sistema NFP-E está sendo desenvolvido para comercialização pela iNfinitesimal LLC, uma empresa spin-off da Northwestern fundada por Espinosa, e deverá estar disponível no final de 2013.

    A técnica está provando ser extremamente robusta e multifuncional. Os pesquisadores usaram o chip NFP-E para transfectar células HeLa com polissacarídeos, proteínas, Grampos de DNA, e DNA de plasmídeo com seletividade de célula única, alta eficiência de transfecção (até 95%), controle qualitativo da dosagem, e viabilidade muito alta (até 92%).


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