Químicos freqüentemente usam um instrumento conhecido como espectrômetro ultravioleta-visível ou UV-Vis para medir a quantidade de radiação ultravioleta e visível absorvida pelos compostos. A quantidade de radiação ultravioleta ou visível absorvida por um composto depende de três fatores: a concentração, c, da amostra; o comprimento do caminho, l, do suporte da amostra, que determina a distância sobre a qual a amostra e a radiação interagem; e o coeficiente de absorção molar, e, às vezes referido como o coeficiente de extinção molar. A equação é declarada como A = ecl e é conhecida como lei de Beer. A equação, portanto, contém quatro variáveis, e para determinar qualquer uma das quatro requer valores conhecidos para três.

Cálculos

Determine a absorbância para o composto no comprimento de onda desejado. Esta informação pode ser extraída do espectro de absorbância produzido por qualquer instrumento padrão UV-Vis. Os espectros são normalmente plotados como absorbância vs. comprimento de onda em nanômetros. Geralmente, o aparecimento de quaisquer "picos" no espectro indica os comprimentos de onda de interesse.

Calcule a concentração da amostra em moles por litro, mol /L, também conhecida como molaridade, M. A equação geral para a molaridade é

M = (gramas de amostra) /(peso molecular do composto) /litro de solução.

Por exemplo, uma amostra contendo 0,10 gramas de tetrafenilciclopentadienona, com um peso molecular de 384 gramas por mole, dissolvidos e diluídos em metanol até um volume final de 1,00 litros exibiriam uma molaridade de: (0,10 g) /(384 g /mol) /(1,00 L) = 0,00026 mol /L.

Determine o comprimento do caminho através do suporte da amostra. Na maioria dos casos, isso é 1,0 cm. Outros caminhos são possíveis, principalmente quando se trata de porta-amostras destinados a amostras gasosas. Muitos espectroscopistas incluem o comprimento do caminho com a informação da amostra impressa no espectro de absorbância.

Calcule o coeficiente de absorção molar de acordo com a equação A = ecl, onde A é absorbância, c é concentração em moles por litro e l é o comprimento do caminho em centímetros. Resolvido para e, esta equação se torna e = A /(cl). Continuando o exemplo do Passo 2, a tetrafenilciclopentadienona exibe dois máximos no seu espectro de absorvância: 343 nm e 512 nm. Se o comprimento do caminho fosse 1,0 cm e a absorvância em 343 fosse 0,89, então, (p

e) (343) = A /(cl) = 0,89 /(0,00026 * 1,0) = 3423

a absorbância de 0,35 a 512 nm,

e (512) = 0,35 /(0,00026 * 1,0) = 1346.