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    Microscopia fotoacústica para identificação de linfonodos sentinela de câncer de mama

    (a) Componentes e estruturas das nanopartículas de 5K-HA-HPPS de duplo direcionamento CD44 e SR-B1. (b) Fluorescência de modalidade dupla e imagem fotoacústica de HA-HPPS em SLNs, que inclui imagens de fluorescência no infravermelho próximo (NIR) para monitoramento de longo prazo do acúmulo e retenção de HA-HPPS em SLNs e microscopia fotoacústica (PAM) para a distinção intraoperatória de SLNs metastáticos de LNs inflamados por distribuição espacial distinta de sinal fotoacústico em diferentes estados de LNs. Crédito:Yanfeng Dai, Xiang Yu, Jianshuang Wei, Fanxin Zeng, Yiran Li, Xiaoquan Yang, Qingming Luo, Zhihong Zhang

    Os linfonodos sentinela metastáticos tumorais são difíceis de distinguir dos linfonodos normais ou inflamados (Inf-LN). Os pesquisadores desenvolveram uma nanopartícula de alvos duplos 5K-HA-HPPS para imagens fluorescentes / fotoacústicas de LN sentinela. A imagem fotoacústica mostrou uma distribuição espacial distinta de 5K-HA-HPPS entre diferentes status LN, em que os sinais foram distribuídos principalmente no centro de T-MLN, mas na periferia de normal e Inf-LNs. Esta capacidade de distinguir T-MLN tem valor potencial de aplicação para cirurgiões em cirurgia de tumor.

    A detecção e caracterização precisas de SLNs são cruciais no estadiamento do câncer e na tomada de decisões terapêuticas. Atualmente, o padrão ouro clínico usado para detectar SLNs é marcá-los com um corante azul ou um nanocolóide radioativo e, em seguida, realizar a biópsia SLN. Mas esses métodos têm desvantagens, a radiocintilografia tem resolução espacial relativamente pobre, e o corante azul irá rotular rapidamente os LNs a jusante, levando a dificuldades em reconhecer SLN de outros nós. Além disso, a remoção do SLN pode causar alguns efeitos colaterais, como linfedema, disfunção do ombro, e dormência no braço. Portanto, o método ideal para detecção de SLN precisa ter as seguintes características:1) A sonda pode entrar rapidamente no sistema linfático e reter no SLN por um tempo. 2) A sonda deve conter um ligante específico para o direcionamento seletivo de células de câncer de mama. 3) A técnica de imagem requer sensibilidade e resolução espacial suficientes para detectar a distribuição das células tumorais em todo o SLN.

    O aumento do LN pode ocorrer durante a invasão de células tumorais e em condições inflamatórias. Portanto, a identificação precisa do status do SLN no intraoperatório ajudará os cirurgiões a escolher o regime de tratamento apropriado e minimizar as complicações causadas pela remoção desnecessária de LN. Embora várias nanossondas baseadas na segmentação passiva de macrófagos em SLN, combinadas com técnicas de imagem, tenham sido desenvolvidas para prever o estado metastático de SLNs, poucos podem distinguir SLNs metastáticos de LNs inflamados in vivo.

    Em um novo artigo publicado em Ciência leve e aplicações , uma equipe de cientistas, liderado pelo professor Zhihong Zhang e pelo professor Qingming Luo do Laboratório Nacional de Optoeletrônica-Huazhong da Universidade de Ciência e Tecnologia de Wuhan, Wuhan, Hubei, China, e Escola de Engenharia Biomédica, Hainan University, Haikou, Hainan, China, e colegas de trabalho desenvolveram uma nanopartícula de ácido hialurônico de alvo duplo CD44 e SR-B1 (5K-HA-HPPS) carregada com o corante fluorescente / fotoacústico próximo ao infravermelho DiR-BOA para SLNs de imagem em câncer de mama. Devido ao tamanho pequeno, carga negativa, e ligante alvo, 5K-HA-HPPS pode rapidamente ( <10 min) migraram para LNs poplíteos (pLN) e mostraram tempo de retenção prolongado (> 12 h) em pLN. Mais interessante, eles descobriram que os sinais fotoacústicos de 5K-HA-HPPS mostraram uma distribuição espacial significativamente distinta entre LNs de diferentes status, cujos sinais foram distribuídos principalmente dentro de SLNs metastáticos de tumor, mas nas periferias de LNs normais e inflamados. A razão de intensidade de PA (R) no centro dos LNs em comparação com aquela na periferia no grupo 5K-HA-HPPS foi de 5,93 ± 0,75 para T-MLNs, que foi muito maior do que para os Inf-LNs (R =0,2 ± 0,07) e N-LNs (R =0,45 ± 0,09). O método e a técnica relatados fornecem uma nova estratégia para identificar com precisão o status dos SLNs durante a cirurgia de câncer de mama e facilitar a implementação de estratégias adequadas de tratamento do tumor.

    A imagem de fluorescência mostrou que 5K-HA-HPPS melhorou em ambos os T-MLNs e Inf-LNs, indicando que T-MLNs e Inf-LNs não podem ser distinguidos de acordo com suas intensidades de fluorescência. Aqui, a imagem de fluorescência de campo amplo é a imagem bidimensional, que possui a vantagem da sensibilidade, conveniência, e não invasividade para monitoramento de longo prazo, mas não consegue distinguir se o sinal fluorescente está localizado dentro do LN ou na periferia do LN. Ao fornecer penetração profunda e uma alta resolução espacial, a microscopia fotoacústica tem um grande potencial para a visualização 3-D da distribuição do sinal fotoacústico em LNs intactos.

    Tanto a infiltração quanto a inflamação das células tumorais resultam no aumento dos SLNs. Portanto, se o aumento do SLN é causado pela metástase de células tumorais ou inflamação deve ser determinado antes da ressecção do SLN. A técnica apresentada possui a capacidade de distinguir SLNs metastáticos de LNs inflamados, assim, será esperado que forneça um método de detecção in vivo para identificar rapidamente se o SLN tem metástase tumoral e reduzirá as complicações causadas pela remoção desnecessária de LN durante a cirurgia de câncer de mama, que tem valor de aplicação clínica potencial.


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