Por Tammie Painter • Atualizado em 24 de março de 2022

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A cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e a cromatografia gasosa (GC) são técnicas analíticas fundamentais que separam moléculas com base em sua interação com uma fase estacionária e uma fase móvel. Embora o princípio básico – compostos mais pesados ​​ou menos polares eluindo mais lentamente – permaneça idêntico, os dois métodos diferem marcadamente em seus parâmetros operacionais, design de coluna e compatibilidade de amostra.

Fase Móvel

A HPLC emprega uma fase móvel líquida, normalmente uma mistura de solvente orgânico (por exemplo, acetonitrila ou metanol), água ultrapura e aditivos que otimizam a solubilidade e a compatibilidade com o analito. Em contraste, o GC utiliza uma fase móvel gasosa; transportadores comuns incluem hélio, nitrogênio, argônio ou hidrogênio, escolhidos com base na volatilidade do analito e nos requisitos do detector.

Colunas

As colunas de HPLC são geralmente tubos de metal ou vidro de 4 a 6 polegadas de comprimento embalados com sílica ou fases estacionárias poliméricas. As colunas de GC, por outro lado, são tubos capilares enrolados cujas paredes internas são revestidas com fases estacionárias adaptadas à análise. Esses capilares podem se estender até 30 m (30 m), fornecendo alta resolução para compostos voláteis.

Compatibilidade de amostra

A GC é ideal para analitos voláteis e termicamente estáveis – pequenas moléculas orgânicas, gases e líquidos de baixo ponto de ebulição. Espécies não voláteis, de alto peso molecular ou carregadas (por exemplo, sais, peptídeos) são mais adequadas para HPLC, que pode lidar com matrizes aquosas e iônicas sem a necessidade de derivatização.

Controle de temperatura

As colunas GC residem dentro de um forno; a temperatura é programada com precisão para otimizar a separação, com temperaturas mais altas acelerando a eluição, mas arriscando a degradação do analito. As colunas de HPLC são normalmente mantidas em temperatura ambiente ou controlada, garantindo interação consistente entre a fase móvel e a fase estacionária.