Sulfato de amônio aquoso [(NH₄) ₂so₄] precipita proteínas através de um processo chamado
salgando . Aqui está como funciona:
1. Interações hidrofóbicas: * As proteínas são tipicamente solúveis em água devido aos seus grupos hidrofílicos (amantes da água), que formam ligações de hidrogênio com moléculas de água.
* No entanto, eles também contêm grupos hidrofóbicos (tementes de água) que tendem a se agrupar.
2. Influência do sulfato de amônio: * Quando o sulfato de amônio é adicionado a uma solução de proteína, ele interage com as moléculas de água, retirando -as efetivamente dos grupos hidrofílicos da proteína.
* Essa interrupção das conchas de hidratação ao redor da proteína expõe os grupos hidrofóbicos.
3. Agregação e precipitação: * À medida que a concentração de sulfato de amônio aumenta, os grupos hidrofóbicos em diferentes moléculas de proteína se tornam mais expostos e interagem entre si, levando à agregação.
* Eventualmente, esses agregados crescem grandes o suficiente para se tornarem insolúveis e precipitados da solução.
fatores que afetam a precipitação: *
Concentração da proteína: Concentrações mais altas de proteína requerem maiores concentrações de sulfato de amônio para precipitação.
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Tipo de proteína: Diferentes proteínas têm graus variados de hidrofobicidade, levando a diferentes sensibilidades à precipitação do sulfato de amônio.
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ph: O pH da solução pode influenciar a carga da proteína e sua interação com sulfato de amônio.
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Temperatura: As temperaturas mais altas geralmente aumentam a solubilidade das proteínas, exigindo maiores concentrações de sulfato de amônio para precipitação.
Aplicações da precipitação de sulfato de amônio: *
Purificação da proteína: É uma técnica comum para concentrar e purificar parcialmente proteínas de misturas complexas.
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Cristalização: O sulfato de amônio pode ser usado para promover a cristalização de proteínas, o que é crucial para estudos estruturais.
Vantagens de usar sulfato de amônio: * Relativamente barato e prontamente disponível.
* Geralmente, não devundir para as proteínas, o que significa que não destrói sua estrutura nativa.
* Permite precipitação seletiva com base nas propriedades da proteína.
Considerações: * É crucial otimizar a concentração de sulfato de amônio para cada proteína específica e resultado desejado.
* O precipitado pode conter outras moléculas além da proteína alvo, exigindo mais etapas de purificação.
* Algumas proteínas podem ser sensíveis a altas concentrações de sal.
Em conclusão, a precipitação de sulfato de amônio é uma técnica valiosa para separar e purificar proteínas, explorando as diferenças em suas interações hidrofóbicas e solubilidade na presença de altas concentrações de sal.
