Veja como preparar um tampão Tris-HCl de 0,1 M a pH 8:

Materiais:

* Tris Base (Tris (hidroximetil) aminometano)
* Solução HCl 1 M
* Água desionizada
* Medidor de pH ou papel indicador de pH
* Cilindro graduado
* Copo
* Haste de mexer

Procedimento:

1. Calcule a quantidade de Tris Base:
* Tris tem um peso molecular de 121,14 g/mol.
* Para preparar 1 litro de solução de Tris 0,1 M, você precisa:
* 0,1 mol/l * 121,14 g/mol =12,114 g de Tris Base
* Ajuste a quantidade proporcionalmente se precisar de um volume diferente de buffer.

2. dissolver a base do Tris:
* Pesar a quantidade calculada de base Tris e dissolve-a em aproximadamente 800 ml de água desionizada em um copo de 1 litro.
* Mexa bem para garantir a dissolução completa.

3. Ajuste o pH:
* usando um medidor de pH: Adicione lentamente a solução HCl 1 M à solução Tris enquanto monitorou continuamente o pH usando um medidor de pH. Mexa bem após cada adição.
* Usando papel indicador de pH: Adicione pequenas quantidades de HCl até que o pH de 8,0 desejado seja atingido, conforme indicado pelo papel de pH.

4. Compensar o volume final:
* Depois que o pH desejado for alcançado, adicione água desionizada para elevar o volume final a 1 litro.

5. verifique e ajuste o pH:
* Recrie o pH com um medidor de pH ou papel indicador e faça pequenos ajustes com HCl ou uma solução diluída de NaOH, se necessário.

Notas importantes:

* Segurança: A base de Tris é levemente irritante para a pele e os olhos. Use óculos de segurança adequados e luvas durante o manuseio.
* calibração do medidor de pH: Verifique se o seu medidor de pH está calibrado corretamente antes do uso.
* Efeitos de temperatura: O pH de um tampão Tris depende ligeiramente de temperatura. Esteja atento a isso se precisar usar o buffer em temperaturas significativamente diferentes da temperatura de calibração.
* armazenamento: Armazene o buffer preparado à temperatura ambiente ou em uma geladeira para armazenamento estendido.

Dicas adicionais:

* ajuste de pH: Normalmente, é mais fácil ajustar o pH adicionando HCL do que aumentá -lo adicionando NaOH.
* Precisão: Um medidor de pH fornecerá uma leitura mais precisa do que o papel de pH.
* Buffers múltiplos: Se você precisar preparar vários buffers, é mais eficiente fazer uma solução estoque concentrada de Tris e diluí -la conforme necessário.

Deixe -me saber se você tiver mais alguma dúvida.