O corante de carga usado na eletroforese contém vários componentes que servem a propósitos diferentes:

1. Dye de rastreamento:
* Este componente permite rastrear visualmente o progresso da eletroforese.
* É um corante colorido que migra através do gel a uma taxa previsível.
* Exemplos comuns incluem:
* bromofenol azul: Migra a uma velocidade semelhante a um fragmento de DNA de 300 a 400 pb.
* xileno cianol ff: Migra a uma velocidade semelhante a um fragmento de DNA de 4-6 kb.

2. Glicerol/sacarose:
* Este componente torna a amostra mais densa que a solução de buffer, por isso afunda no poço e não se difunde.
* Isso garante que a amostra seja carregada corretamente e permaneça concentrada na parte inferior do poço.

3. Buffers:
* Esses componentes ajudam a manter o pH da solução de amostra e tampão durante a eletroforese.
* Eles garantem a função adequada das enzimas envolvidas no processo.
* Os exemplos incluem buffers Tris-Borato-Edta (TBE) ou Tris-Acetato-Edta (TAE).

4. Outros aditivos (opcionais):
* sds (dodecil sulfato de sódio): Esse detergente é frequentemente adicionado às amostras de proteínas para desnatá -las e revesti -las com uma carga negativa, permitindo que elas migrem com base no tamanho.
* Reduzindo agentes: Como ditiotreitol (DTT) ou β-mercaptoetanol, às vezes são adicionados para quebrar ligações dissulfeto nas proteínas, desnutando-as ainda mais.

Pontos -chave a serem lembrados:

* A composição específica do corante de carga pode variar dependendo do tipo de eletroforese que está sendo realizada (DNA, RNA ou proteína).
* A escolha do corante de rastreamento deve ser apropriada para a faixa de tamanho das moléculas que estão sendo analisadas.
* O corante de carregamento deve ser usado com moderação para evitar a introdução de muito volume para os poços, o que pode afetar a resolução da banda.

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