Os aminoácidos, os blocos de construção das proteínas, podem ser separados com base em várias técnicas. Um método comum é a cromatografia de troca iônica, que separa moléculas com base em suas cargas iônicas. Aqui está uma explicação simplificada de como funciona a cromatografia de troca iônica:

1. Preparação da Coluna de Troca Iônica:
- Uma coluna de troca iônica é preenchida com uma resina contendo grupos carregados que podem atrair e se ligar a moléculas (íons) com carga oposta.
- A resina pode ter carga positiva (resina de troca catiônica) ou carga negativa (resina de troca aniônica).

2. Exemplo de aplicação:
- A mistura ou amostra de aminoácidos é aplicada à coluna de troca iônica.

3. Soluções tampão:
- Diferentes soluções tampão com diferentes concentrações de pH e sal são passadas através da coluna.

4. Interação eletrostática:
- Os aminoácidos têm cargas líquidas diferentes em valores de pH diferentes devido à presença de vários grupos funcionais carregados.
- À medida que as soluções tampão passam pela coluna, os aminoácidos interagem com os grupos carregados da resina com base nas suas cargas líquidas.
- Os aminoácidos carregados positivamente (cátions) se ligarão à resina carregada negativamente na cromatografia de troca catiônica, enquanto os aminoácidos carregados negativamente (ânions) se ligarão à resina carregada positivamente na cromatografia de troca aniônica.

5. Eluição:
- Ao alterar o pH ou a concentração de sal das soluções tampão, a força das interações eletrostáticas entre os aminoácidos e a resina pode ser modificada.
- À medida que as condições do tampão mudam, diferentes aminoácidos serão eluídos (lavados) da coluna em momentos diferentes.
- Este processo de eluição separa os aminoácidos com base nas suas diferenças de carga.

6. Detecção e coleta:
- À medida que os aminoácidos eluem da coluna, eles são detectados usando um detector, como um detector ultravioleta-visível (UV-Vis).
- Os aminoácidos podem então ser recolhidos como fracções separadas.

7. Fracionamento e Análise:
- As frações coletadas são então analisadas e caracterizadas utilizando técnicas como cromatografia em camada fina (TLC) ou eletroforese para confirmar a identidade dos aminoácidos separados.

A cromatografia de troca iônica é amplamente utilizada para separar e purificar aminoácidos, proteínas e outras moléculas carregadas. Ele fornece controle preciso sobre a separação de compostos com base em suas propriedades de carga específicas.