HPLC (cromatografia líquida de alto desempenho) e GC (cromatografia gasosa) são métodos que os cientistas usam para analisar amostras para determinar o que a amostra contém ou a concentração de moléculas na amostra. Ambos usam o mesmo princípio, que moléculas mais pesadas eluirão, ou fluirão, mais lentamente que as mais leves (a polaridade também desempenha um papel no tempo de eluição). Embora a idéia seja a mesma, o GC e a HPLC apresentam várias diferenças.
A fase móvel
A fase móvel do equipamento de cromatografia é a substância que move a amostra pela máquina. Na HPLC, a fase móvel é um líquido composto de solvente orgânico, água ultrapura e outros ingredientes para garantir sua compatibilidade com a amostra. O GC usa gás para sua fase móvel. Os gases utilizados incluem hélio, nitrogênio, argônio ou hidrogênio, dependendo do que está sendo analisado.
As colunas
À medida que as amostras viajam pelas colunas de cromatografia, a amostra e a fase móvel interagem com o conteúdo da coluna, causando os componentes de a amostra eluir em momentos diferentes. As colunas de HPLC são tipicamente tubos de metal ou vidro de 10 a 15 cm de comprimento, bem embalados com sílica ou com diferentes comprimentos de cadeia de carbono. Os sistemas de GC possuem colunas capilares em espiral com paredes internas revestidas com vários materiais, dependendo das necessidades do laboratório. Esticadas, as colunas do GC podem atingir comprimentos de 100 pés.
As amostras do GC são usadas para compostos voláteis (aqueles que se decompõem rapidamente) enquanto a HPLC é melhor para amostras menos voláteis. Se uma amostra contém sais ou carrega uma carga, ela deve ser analisada por HPLC, não por GC.
Controle de Temperatura
As colunas do GC são alojadas em um forno dentro da máquina. Um computador altera a temperatura enquanto as amostras são analisadas. Quanto mais alta a temperatura, mais rápida a amostra elui, mas temperaturas muito altas produzem resultados ruins. As colunas de HPLC são mantidas em uma temperatura estável (geralmente na temperatura ambiente) o tempo todo.