p Estratégia de leitura SERS in-situ para células individuais. (A) O esquema da estratégia para melhorar a confiabilidade, reduzindo os tempos de coloração. (B) Ensaio de coloração X-gal para células. (C e D) Leitura SERS in-situ. Os triângulos vermelho e preto marcam as células positivas e negativas, respectivamente. A banda azul indica o pico do marcador de hidrolisados de X-gal. Crédito:LI Shaofei
p Recentemente, um grupo de pesquisa liderado pelo Prof. Yang Liangbao dos Institutos de Ciências Físicas de Hefei (HFIPS) da Academia Chinesa de Ciências (CAS) desenvolveu uma estratégia de leitura de espectroscopia Raman aprimorada de superfície (SERS) para melhorar a confiabilidade da beta-galactosidase ensaio de atividade com base na coloração X-gal. Resultados de pesquisas relevantes foram publicados em Talanta. p A atividade da beta-galactosidase (β-gal) está intimamente relacionada às células de senescência e doenças associadas ao envelhecimento. A coloração com X-gal (5-bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactosídeo) é o ensaio colorimétrico mais amplamente utilizado e comercialmente disponível com equipamento de baixo custo e não intensivo.
p Contudo, A leitura tradicional da atividade β-gal com base na coloração X-gal é limitada a baixa sensibilidade em tempos de incubação curtos e falsos positivos em tempos de incubação longos. É difícil obter resultados positivos consistentes na proliferação celular porque o estado de crescimento da célula muitas vezes não é homogêneo.
p Neste estudo, os pesquisadores revelaram o papel potencial dos hidrolisados X-gal insolúveis em causar falsos positivos. Hidrolisados X-gal, causando poluição por difusão difusa dependendo do meio orgânico, pode orientar a estratégia de leitura como um fator de evasão universal.
p Consequentemente, eles propuseram a estratégia de leitura SERS sensível e rápida in-situ para identificar e localizar células positivas β-gal com base na coloração X-gal.
p Esta nova estratégia provou ser necessária e viável. Resolveu os desafios da leitura tradicional, e isso será de grande importância em diferentes aplicações, como pesquisas relacionadas à idade e terapia anti-envelhecimento.