O cientista mais creditado por refutar a teoria da geração espontânea é Louis Pasteur .

Enquanto outros, como Francesco Redi e Lazzaro Spallanzani, haviam conduzido experimentos que desafiaram a teoria, o trabalho de Pasteur foi crucial para fornecer evidências definitivas contra ela. Ele usou seu famoso experimento de frasco de pescoço de cisne para demonstrar que os microorganismos só crescem em caldo quando expostos ao ar, não espontaneamente dentro do próprio caldo. Esse experimento mostrou efetivamente que a vida surge apenas da vida pré-existente, não da matéria não viva.