Durante a cromatografia em camada fina, um técnico coloca manchas de uma mistura química em uma placa plana revestida com uma camada de material absorvente e, em seguida, coloca a parte inferior da placa em solvente. À medida que o solvente sobe na placa, os produtos químicos da mistura sobem com ela em taxas diferentes e, portanto, se separam. Este teste determina quais produtos químicos estão em uma mistura comparando as taxas de viagem de incógnitas com os padrões conhecidos. Os resultados, no entanto, podem ser afetados por muitos fatores.
TL; DR (muito longo; não leu)
Os valores do fator de retenção na cromatografia em camada fina são afetados pelo absorvente, o solvente, a própria placa de cromatografia, técnica de aplicação e a temperatura do solvente e da placa.
Fatores de retenção
O fator de retenção de um produto químico durante a cromatografia em camada fina é uma medida de quão longe ele se move para cima da placa em resposta ao movimento do solvente. Como o movimento absoluto do produto químico depende de quão longe o solvente viaja, você calcula os valores do fator de retenção em relação ao grau de movimento do solvente. O fator de retenção de um produto químico é a distância vertical movida pelo produto químico do ponto em que foi originalmente aplicado à placa, dividida pela distância percorrida pelo solvente - medida a partir do mesmo ponto inicial.
Placa de cromatografia em camada fina
A própria placa de cromatografia em camada fina pode afetar o valor do fator de retenção obtido para um determinado produto químico. As placas de cromatografia de camada fina podem ser revestidas com uma variedade de sólidos absorventes; mais frequentemente sílica ou alumina. Como o fator de retenção é baseado na afinidade relativa do produto químico em relação ao absorvente em comparação com o solvente, a alteração do absorvente pode alterar bastante o fator de retenção. Além disso, a espessura e a uniformidade da camada de absorvente podem variar de chapa para chapa, especialmente se forem artesanais. Esses fatores também podem alterar o valor do fator de retenção de produtos químicos.
Fatores de retenção de impactos de solvente
Como o solvente carrega o produto químico na placa, o solvente específico usado também terá um impacto substancial no valor do fator de retenção para o produto químico. Um solvente que tenha uma interação mais forte para um determinado produto químico superará mais facilmente qualquer afinidade do produto químico pela camada absorvente e o levará mais longe em um determinado período de tempo. As misturas de solventes também podem ter efeitos diferentes, dependendo da proporção de cada solvente.
Outros fatores
Existem alguns outros fatores que podem afetar o fator de retenção em alguns casos. A temperatura do solvente e da placa pode fazer pequenas alterações, pois, por exemplo, o solvente pode dissolver melhor os produtos químicos que está transportando a temperaturas mais altas. A técnica do técnico na aplicação da amostra na placa também pode alterar o fator de retenção. A aplicação de muita amostra pode resultar em faixas grandes e difusas de produto químico subindo na placa, dificultando a medição precisa da distância que o produto químico foi transportado.
