Novo protocolo de detecção de aptâmero-SERS para detectar miR-122 relacionado à inflamação hepática
Ilustração esquemática da detecção de SERS de miR-122 exossomal em camundongos expostos a irradiação de raios-X. Crédito:Mohamed
Uma equipe liderada pelo Prof. Huang Qing nos Institutos de Ciências Físicas de Hefei (HFIPS) da Academia Chinesa de Ciências desenvolveu um novo biossensor baseado em espectroscopia Raman aprimorada de superfície combinada com aptâmero (SERS) para alcançar o microRNA-122 inflamatório (miR -122) detecção em exossomos secretados por células.
Ao combinar etiquetas SERS modificadas por aptâmeros e um elemento de captura de miRNA baseado em nanopartículas magnéticas, os pesquisadores desenvolveram um ensaio SERS-sanduíche sem rótulo para detectar e avaliar o miR-122 exossomal, que é relatado como estando ativamente envolvido na ativação retal por radiação. e lesões hepáticas ou inflamação.
As etiquetas SERS foram compostas por um aptâmero tiolado, que foi modificado com bases G adicionais na extremidade 3' e funcionalizado em nanopartículas de casca de Au através de ligações Au-S. O elemento de captura foi preparado ancorando um aptâmero tiolado em nanopartículas magnéticas.
Para o reconhecimento do miRNA alvo, o elemento de captura magnética foi inicialmente exposto ao alvo, e a sequência do miRNA foi capturada via imunorreação entre o reconhecimento e a sequência alvo. As nanopartículas foram separadas usando um campo magnético externo, lavadas e sondadas com tags SERS.
Como resultado, a sequência alvo foi capturada via formação de sanduíche. O sinal Raman aprimorado da base de adenina na extremidade 3' da etiqueta SERS foi usado para calibrar a saída.
Os pesquisadores então utilizaram a metodologia SERS combinada com aptâmeros para detectar o miRNA como biomarcador para avaliar a lesão orgânica induzida por radiação.
As nanopartículas magnéticas nesta pesquisa fornecem facilidade adicional de separação rápida e pronta de analitos usando um campo magnético externo. Este método também é aplicável para avaliar a inflamação do fígado desencadeada pela droga através do exame do miRNA exossomal como biomarcador.
Em geral, este método pode fornecer diagnóstico fácil e precoce para analisar casos de inflamação hepática em nível clínico.
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