A microscopia de força atômica revela alta heterogeneidade nas vesículas da membrana bacteriana
p (A) Imagem de microscopia eletrônica de varredura de uma célula bacteriana e vesículas de membrana extracelular (MVs). (B) Desenho esquemático de observação MVs usando imagem de fase de microscopia de força atômica. (C) Mapeamento das propriedades físicas dos MVs usando imagens de fase de microscopia de força atômica. MVs são codificados por cores em uma escala que varia de "não aderente / duro" (esferas de cor avermelhada) a "aderente / macio" (esferas de cor esverdeada). Crédito:Kanazawa University
p Um aspecto da atividade bacteriana é a produção das chamadas vesículas de membrana extracelular (MVs):'pacotes' biológicos envoltos em uma membrana de bicamada lipídica, transportando, por exemplo, material genético. Além de ter funções biológicas específicas, MVs são cada vez mais usados em aplicações nanobiotecnológicas, incluindo entrega de drogas e transporte de enzimas. A fim de compreender melhor os processos que envolvem MVs, uma compreensão completa de suas propriedades físicas é essencial. Em particular, o grau de heterogeneidade das vesículas liberadas por um único tipo de bactéria é um ponto importante. Agora, Azuma Taoka da Universidade de Kanazawa, Nobuhiko Nomura da Universidade de Tsukuba e colegas abordaram esta questão, e demonstrar uma heterogeneidade física anteriormente não reconhecida nas vesículas de membrana de quatro tipos de bactéria. p Os pesquisadores aplicaram microscopia de força atômica de imagem de fase (AFM) para estudar as propriedades físicas dos MVs produzidos por
E. coli, P. aeruginosa, P. denitrificans e B. subtilis . Na imagem de fase AFM, uma amostra é 'batida' com uma ponta cantilever oscilante de tamanho nanométrico; o atraso observado na oscilação da ponta em comparação com a oscilação livre fornece uma medida da dissipação de energia devido à interação com a superfície da amostra. Essa dissipação, por sua vez, está relacionado às propriedades físicas da superfície, incluindo adesão, elasticidade e fricção, variações das quais são devidas a diferenças de composição.
p Taoka, Nomura e colegas gravaram imagens de fase de muitos MVs, e os MVs codificados por cores em uma escala que varia de "não aderente / rígido" (baixa adesão, elasticidade e / ou fricção) para "aderente / macio" (alta adesão, elasticidade e / ou fricção). Ao analisar esses mapas, os cientistas descobriram uma grande diversidade de propriedades físicas de MVs. Eles verificaram se os mapas mudaram durante a geração de imagens; as propriedades físicas eram estáveis com o tempo, portanto, a diversidade pode ser considerada uma característica intrínseca dos MVs.
p Os pesquisadores descobriram que a heterogeneidade física é causada por fatores biológicos, já que o tamanho do MV e as mudanças de fase não estão correlacionados. Além disso, eles observaram que diferentes tipos de bactérias formam MVs com diferentes distribuições de propriedades físicas. Finalmente, os cientistas argumentaram que a alta heterogeneidade observada reflete a composição química dos MVs sendo heterogênea.
p O trabalho de Taoka, Nomura e colegas não apenas apresentam importantes insights sobre as propriedades dos MVs produzidos por diferentes bactérias, mas também mostra o poder da mudança de fase AFM como uma ferramenta para vesículas biológicas. Citando os pesquisadores:"Espera-se que o uso dessas técnicas de ponta para mapeamento físico em nanoescala contribua para fornecer mais informações detalhadas sobre a natureza não descoberta de MVs bacterianos e elucidar os mecanismos moleculares que suportam suas funções."