A tomografia de coerência óptica oferece oportunidades surpreendentes para obter imagens da estrutura complexa do tecido vivo, mas carece de informações funcionais. Apresentamos a tomografia de coerência óptica de campo total dinâmico como uma técnica para obter imagens de organóides retinais derivados de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos vivos (hiPSC) de forma não invasiva. Imagens coloridas com contraste endógeno ligado à motilidade da organela são geradas, com resolução espacial submicrométrica e resolução temporal de milissegundos, criando uma maneira de identificar tipos específicos de células em tecidos vivos por meio de seu perfil dinâmico.

As modalidades atuais de imagem de tecidos vivos e culturas de células 3-D são invasivas, lento ou sem resolução espacial. A tomografia de coerência óptica de campo total dinâmico (D-FFOCT) é um rótulo livre, não invasivo, técnica quantitativa aliando altas resoluções espaciais e temporais. Esta técnica se baseia em interferometria de baixa coerência para amplificar as flutuações de fase e amplitude, criado movendo estruturas de dispersão dentro de amostras biológicas, produzindo um contraste de motilidade. D-FFOCT abre a possibilidade de acompanhar o desenvolvimento de estruturas multicelulares 3-D complexas, como os organóides retinais.

Em um novo artigo de Jules Scholler, Kassandra Groux, et al., publicado em Light:Ciência e Aplicações , uma equipe de especialistas em óptica (Institut Langevin, Paris, França) liderado pela Dra. Kate Grieve do Quinze-Vingts National Eye Hospital (Paris, França), em colaboração com biólogos celulares (Institut de la Vision, Paris, França), desenvolveram e aplicaram uma nova modalidade de imagem para a imagem de organóides retinais em desenvolvimento.

Esses cientistas resumem o princípio operacional de seu microscópio:

"Usamos a amplificação interferométrica de um dispositivo de tomografia de coerência óptica de campo completo e estudamos a flutuação do sinal interferométrico para construir quantitativamente os volumes tomográficos com um contraste metabólico. Devido à nossa alta sensibilidade, somos capazes de reconstruir imagens de alto contraste de amostras quase transparentes sem usar rótulos exógenos. "

"Devido à configuração de campo total e alta sensibilidade, nosso método é mais rápido e requer intensidade de iluminação muito menor do que as técnicas de microscopia não linear que podem danificar a amostra de forma irreversível. Isso nos permite estudar o desenvolvimento da mesma amostra ao longo de períodos de várias semanas ", acrescentaram.

"D-FFOCT terá muitas aplicações potenciais para tecido vivo in vitro, incluindo modelagem de doenças, ressonância magnética, e triagem de drogas, "prevêem os cientistas.