componentes de PCR e suas funções:

1. DNA do modelo:

* função: A sequência de DNA que você deseja ampliar. Serve como o plano para a enzima polimerase copiar.

2. Primers:

* função: Sequências de DNA curtas e de fita única (normalmente 18-30 nucleotídeos) que são complementares a regiões específicas no DNA do modelo. Eles se ligam ao DNA do modelo e fornecem um ponto de partida para a polimerase de DNA.

3. Polimerase de DNA:

* função: Uma enzima que sintetiza novos fios de DNA usando o DNA e os iniciadores de modelo. Adiciona nucleotídeos à extremidade 3 'do primer na direção de 5' a 3 '.

4. Triphofosfatos de desoxinucleosídeo (dntps):

* função: Blocos de construção de DNA. Eles consistem em quatro tipos:DATP, DCTP, DGTP e DTTP, que representam as quatro bases (adenina, citosina, guanina e timina). A polimerase de DNA os usa para montar os novos fios de DNA.

5. Solução de buffer:

* função: Contém sais e íons que mantêm a força de pH e iônico apropriados para a atividade ideal de DNA polimerase.

6. Cloreto de magnésio (MGCL2):

* função: Um cofator para a polimerase de DNA, necessário para sua atividade catalítica. Também ajuda a estabilizar a estrutura do DNA.

7. Água:

* função: Solvente para a reação e fornece um meio para os componentes interagirem.

Aqui está um breve resumo do processo de PCR:

1. desnaturação: A mistura de reação é aquecida a 94-98 ° C, que separa o DNA do modelo de fita dupla em fios únicos.
2. recozimento: A temperatura é reduzida para 50-65 ° C, permitindo que os iniciadores se ligassem às suas seqüências complementares no DNA do modelo de fita única.
3. extensão: A temperatura é elevada para 72 ° C, a temperatura ideal para a polimerase de DNA. A polimerase estende os iniciadores, adicionando DNTPs para criar novos fios de DNA.

Essas três etapas são repetidas para vários ciclos, resultando em amplificação exponencial da sequência de DNA alvo.