O citrato de sódio desempenha um papel crucial no isolamento do DNA, agindo como um quelante , o que significa que se liga e remove
íons metálicos da solução. Isso é importante por vários motivos:
1. Inativação de dnases: * DNASES são enzimas que degradam o DNA. Muitos dnases requerem íons metálicos como magnésio (mg
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) como cofatores para sua atividade.
* O citrato de sódio se liga a esses íons metálicos, tornando -os indisponíveis para as DNases, inibindo efetivamente sua atividade e protegendo o DNA da degradação.
2. Prevenção da precipitação do DNA: * O DNA é carregado negativamente e, na presença de altas concentrações de íons metálicos, pode precipitar fora da solução.
* A ação quelante do citrato de sódio impede essa precipitação, reduzindo a concentração de íons metálicos livres, permitindo que o DNA permaneça dissolvido e mais fácil de isolar.
3. Eficiência de lise aprimorada: * Alguns protocolos de isolamento de DNA envolvem o uso de detergentes para as células da Lyse e liberam o DNA.
* O citrato de sódio pode ajudar a melhorar a eficiência da lise, promovendo a formação de micelas, estruturas que podem encapsular e quebrar as membranas celulares.
No geral, o citrato de sódio contribui para um isolamento de DNA bem -sucedido por: * Protegendo o DNA da degradação inibindo DNases.
* Prevenindo a precipitação do DNA e garantindo sua solubilidade.
* Melhorando a lise celular e a liberação de DNA.
Em resumo, o citrato de sódio é um reagente valioso no isolamento do DNA, garantindo a integridade e a disponibilidade do DNA por meio de suas propriedades quelantes.