Acetato de sódio desempenha vários papéis cruciais no processo de isolamento do DNA. Aqui estão as principais funções do acetato de sódio no isolamento do DNA:
1.
Precipitação de ácidos nucléicos: O acetato de sódio, quando adicionado a uma solução de DNA sob condições controladas de temperatura e pH, auxilia na precipitação de ácidos nucléicos (DNA e RNA) da solução. Reduz a solubilidade do DNA neutralizando as cargas negativas presentes na estrutura de fosfato da molécula de DNA. Isto permite que o DNA forme sais insolúveis, que podem ser facilmente separados dos outros componentes do lisado celular.
2.
Remoção de contaminantes: O acetato de sódio auxilia na remoção de contaminantes, como proteínas, detritos celulares e outras impurezas, durante o isolamento do DNA. Quando o acetato de sódio é adicionado, estes contaminantes permanecem em solução, enquanto o DNA precipitado pode ser coletado por centrifugação.
3.
Controle de pH: O acetato de sódio atua como tampão para manter o pH apropriado durante o isolamento do DNA. O pH ideal para precipitação de DNA é geralmente entre 5,0 e 5,2. O acetato de sódio ajuda a manter esta faixa de pH, que é crucial para a precipitação eficiente do DNA.
4.
Alta concentração de sal: A alta concentração de sal criada pelo acetato de sódio na solução facilita a formação de complexos DNA-proteína. Estes complexos são essenciais para a separação eficaz do DNA de outros componentes celulares.
5.
Otimização da recuperação de DNA: O acetato de sódio contribui para a otimização dos rendimentos de recuperação de DNA, reduzindo interações não específicas entre DNA e contaminantes. A concentração adequada de sal ajuda a garantir que o DNA seja precipitado seletivamente, minimizando a perda de DNA durante o processo de isolamento.
6.
Compatibilidade com etapas subsequentes: O acetato de sódio é compatível com etapas subsequentes de isolamento e purificação de DNA. O DNA precipitado pode ser facilmente lavado, redissolvido em tampões apropriados e posteriormente processado para aplicações posteriores, como PCR, reações enzimáticas ou sequenciamento.
No geral, o acetato de sódio desempenha um papel vital na precipitação do DNA dos lisados celulares durante o isolamento do DNA. Contribui para a separação eficaz do DNA das impurezas, mantendo condições ideais de pH e facilitando o processamento posterior do DNA isolado.
