O ágar é uma substância gelatinosa derivada das paredes celulares purificadas das algas vermelhas. É adicionado aos meios microbiológicos, que são materiais sobre os quais os microorganismos são cultivados em laboratórios, a fim de fornecer mais de uma estrutura sólida para a substância. O ágar não tem valor nutricional, então quando os cientistas o usam para cultivar microorganismos, eles adicionam vários nutrientes para aumentar o crescimento bacteriano em placas de petri ou tubos de ensaio. Quando os pesquisadores armazenam bactérias em um tubo de ensaio, é referido como um ágar inclinado porque o meio de crescimento líquido se solidifica enquanto o tubo está em uma posição inclinada. Um topo de tampa de rosca na inclinação impede o agar de secar.
Preparação média
O meio é preparado de forma diferente para inclinações do que as placas de petri. A esterilização é feita com o ágar nos tubos; As placas de petri são pré-esterilizadas antes de o ágar esterilizado ser derramado nelas. Meça a quantidade de água necessária e coloque-a em um frasco de Erlenmeyer. Aqueça-a em um fogão até que esteja quase fervendo. Adicione outros ingredientes, se necessário, e agite a mistura devagar e constantemente até que eles se dissolvam. Estes ingredientes podem incluir extrato de carne, peptona e tampões de pH, dependendo do tipo de microorganismo a ser cultivado.
Adicione o Ágar
Antes de adicionar o pó de ágar desidratado, misture-o com uma pequena quantidade de água destilada fria para evitar a formação de grumos. Tenha cuidado ao adicionar ágar ao líquido quente, pois ele pode espumar e transbordar o pote. Adicione pequenas quantidades de agar de cada vez e mexa para distribuir uniformemente o ágar. Desligue o fogo quando a mistura começar a ferver, antes de ferver.
Tubos de esterilização
Coloque os tubos de ensaio destapados em um suporte para tubos de ensaio. Encha os tubos de ensaio transferindo cerca de 5 mililitros - cerca de 0,17 onça ou 1 colher de chá - do agar fundido da panela usando uma pipeta estéril. Tampe com folga cada um dos tubos de teste, porque o ágar não será esterilizado se eles estiverem bem vedados. Esterilize todos os tubos em uma autoclave por cerca de 25 minutos a 121 graus Celsius, ou 250 graus Fahrenheit.
Armazene em uma posição inclinada
Quando o ágar ainda estiver quente, incline cuidadosamente a prateleira do rack os tubos de teste em uma superfície sólida ou um livro grosso, certificando-se de que o meio dentro dos tubos esteja em uma posição inclinada em relação aos tubos de teste. Deixe o meio esfriar e solidificar neste ângulo, o que aumenta a área da superfície do ágar. Aperte as tampas dos tubos de teste depois que o ágar tiver esfriado. As inclinações estão prontas para uso quando o ágar solidificar. Eles podem ser armazenados à temperatura ambiente ou no refrigerador para uso futuro.
Inocular o Slant
Inocular o slant transferindo células com um loop de inoculação de um microorganismo de colônia única em uma placa para a superfície da inclinação. Mova o laço pela superfície da inclinação e recapitule os tubos. Incubar a inclinação até que haja evidência de crescimento, em seguida, coloque o tubo em um refrigerador.
