Ao testar o efeito do pH na atividade enzimática, varia apenas o pH, mantendo outros fatores constantes. Esses outros fatores incluem concentração de enzima, concentração de substrato e temperatura. Os fatores que permanecem constantes são chamados de variáveis ​​de controle. As variáveis ​​de controle permitem concluir que os resultados da atividade enzimática obtidos no experimento são devidos à variação do pH, a variável independente. Saber quais fatores não mudar em um experimento é tão importante quanto saber qual fator pode variar, caso contrário, será difícil concluir se os resultados são realmente devidos à única coisa que foi testada.

Pick One Acid Ou uma base

O pH de uma solução pode ser alterado pela dissolução de diferentes quantidades de um ácido ou de uma base em água. Uma maneira de testar o efeito do pH na atividade da enzima é adicionar gradualmente gotas de um ácido forte ou uma base forte na solução que contém a enzima e, em seguida, observar o ponto em que a atividade da enzima desacelera ou pára. Um ácido é definido como um composto que doa um íon de hidrogênio, chamado de próton (H +), e uma base é definida como um composto que doa um íon de hidróxido (-OH). Ácidos e bases diferentes têm diferentes números de prótons ou íons hidróxido para dar. Nem todos os prótons ou íons hidróxido são doados imediatamente quando um ácido ou base é adicionado a uma solução, mas o número de prótons doados ou íons hidróxido muda o pH em taxas diferentes. Assim, é uma boa idéia variar o pH em um experimento enzimático usando apenas um tipo de ácido ou um tipo de base. Caso contrário, outras variáveis ​​são adicionadas involuntariamente.

Tecidos também mudam o pH

Alguns experimentos de laboratório que estudam a atividade enzimática envolvem a moagem de tecido fresco para liberar as enzimas das células e então adicionar substrato para medir a enzima. atividade. Tecido fresco contém sangue. Devido à presença de enzimas no sangue que alteram o gás de dióxido de carbono que é dissolvido no sangue em ácido carbônico, o próprio tecido pode afetar o pH. Assim, em experimentos que envolvem atividade enzimática em tecido fresco, é útil lavar o sangue em um béquer de água fria antes de moer o tecido. Isso minimizará a mudança não intencional de pH devido ao tecido, de modo que a alteração intencional do pH possa ser estudada.

Mantenha os tamanhos os mesmos

Como discutido acima, a concentração de enzima é um controle fator que não deve ser variado ao testar o efeito do pH na atividade enzimática. No entanto, procedimentos experimentais ainda inerentemente variam a concentração de enzimas de maneiras sutis. Se alguém está usando uma solução pura de enzimas, mantendo a concentração de enzima constante. No entanto, em experimentos nos quais a enzima é de tecido fresco, como pedaços de batata, pedaços de plantas ou pedaços de fígado, o tamanho dos pedaços muda a quantidade de enzima em cada tubo de ensaio. Assim, será útil cortar os pedaços de tecido da maneira mais uniforme possível. Esse é outro exemplo de como saber o que não mudar e por que é difícil não evitar completamente a alteração ajuda a interpretar os resultados de um fator como o pH.