p Imagens SEM mostram o efeito da sequência de DNA e comprimento da formação de nanoflores de DNA. (A) dNTPs (100 mM), (B) DNA rico em adenina (0,25 mM), (C) ssDNA rico em timina (0,25 mM), (D) ssDNA rico em guanina (0,25 mM), (E) ssDNA rico em citosina (0,25 mM), (F) dsDNA A-T (51 pb; 0,25 mM), (G) dsDNA G-C (51 pb; 0,25 mM), (H) amplicon de PCR (200 bp; 600 nM), (I) DNA de plasmídeo (5420 pb; 20 nM), e (J) DNA genômico (4857 kbp; 10 pM). Crédito:KAIST
p Um método ecológico para sintetizar nanoflores de DNA-cobre com alta eficiência de carga, baixa citotoxicidade, e forte resistência contra nucleases foi desenvolvida pelo Professor Hyun Gyu Park no Departamento de Engenharia Química e Biomolecular e seus colaboradores. p A equipe de pesquisa formou com sucesso uma nanoestrutura em forma de flor em uma condição ecologicamente correta, usando interações entre íons de cobre e DNA contendo grupos amida e amina. As nanoflores resultantes exibem alta capacidade de carga de DNA, além de baixa citotoxicidade.
p Os nanocristais em forma de flor, chamados de nanoflores, ganharam atenção por suas características distintas de alta rugosidade superficial e alta área de superfície para proporções de volume. As nanoflores têm sido usadas em muitas áreas, incluindo catálise, eletrônicos, e química analítica.
p Tarde, avanços de pesquisa foram feitos na geração de nanoflores híbridos inorgânicos-orgânicos contendo várias enzimas como componentes orgânicos. A hibridização com materiais inorgânicos aumentou muito a atividade enzimática, estabilidade, e durabilidade em comparação com as enzimas livres correspondentes.
p Geralmente, a formação de nanocristais de proteína requer alto tratamento térmico, portanto, tem limitações para atingir as altas capacidades de carga do DNA intacto.
p A equipe de pesquisa abordou o problema, com foco no fato de que ácidos nucleicos com estruturas bem definidas e propriedades de reconhecimento seletivo também contêm grupos amida e amina em suas nucleobases. Eles provaram que estruturas semelhantes a flores podem ser formadas usando ácidos nucléicos como um modelo sintético, que abriu o caminho para sintetizar as nanoflores híbridas contendo DNA como um componente orgânico em uma condição ecologicamente correta.
p Ilustração esquemática. (A) Ilustração esquemática da formação de nanoflores de DNA inorgânicos resistentes à nuclease. (B) Imagens de SEM mostrando o crescimento dependente do tempo de nanoflores de DNA. Crédito:KAIST
p A equipe também confirmou que este método sintético pode ser aplicado universalmente a qualquer sequência de DNA contendo grupos amida e amina. Eles disseram que sua abordagem é bastante original, considerando que a maioria dos trabalhos anteriores se concentrou na utilização do DNA como um ligante para montar os nanomateriais. Eles disseram que o método tem vários recursos vantajosos. Primeiro, o procedimento sintético 'verde' não envolve quaisquer produtos químicos tóxicos, e apresenta baixa citotoxicidade e forte resistência contra nucleases. Segundo, as nanoflores obtidas exibem capacidades de carga de DNA excepcionalmente altas.
p Sobre tudo, tais características superiores de nanoflores híbridos permitiram a detecção sensível de várias moléculas, incluindo fenol, peróxido de hidrogênio, e glicose. As nanoflores de DNA-cobre mostraram atividade de peroxidase ainda maior do que as nanoflores de proteína-cobre, que pode ser devido à maior área de superfície das estruturas em forma de flor, criando uma chance maior de aplicá-los no campo de detecção de detecção de peróxido de hidrogênio.
p A equipe de pesquisa espera que sua pesquisa crie diversas aplicações em muitas áreas, incluindo biossensores, e seja posteriormente aplicada em aplicações terapêuticas.
p Professor Park disse, "O componente inorgânico nas nanoflores híbridas não exibe apenas baixa citotoxicidade, mas também protege o DNA encapsulado de ser clivado por enzimas endonuclease. Usando este recurso, a nanoestrutura será aplicada no desenvolvimento de portadores terapêuticos de genes. "