p Um novo sistema de microscopia de iluminação estruturada por fluorescência de super resolução, ou fluorescência SIM, agora está disponível no EMSL como parte dos recursos de isolamento de células e análise de sistemas do laboratório. p O acesso ao novo instrumento se dá por meio do processo de proposta do usuário do EMSL. O Sistema de Uso EMSL lista-o como Microscópio:Fluorescência, Iluminação Estruturada de Super Resolução.

p Classificado como um microscópio de super resolução, o SIM de fluorescência oferece imagens de resolução espacial significativamente mais altas do que os microscópios de luz convencionais. O poder de resolução do SIM de fluorescência é de cerca de 100-130 nanômetros. Os microscópios de luz não podem resolver estruturas menores do que aproximadamente 250-300 nanômetros. Para colocar isso em perspectiva, uma molécula de água tem menos de um nanômetro, e um germe típico tem cerca de 1, 000 nanômetros.

p O SIM de fluorescência renderiza imagens de super resolução em três dimensões. Ser capaz de visualizar amostras e sua distribuição espacial em 3-D fornece uma maior profundidade de informações para um entendimento científico mais claro.

p De acordo com Galya Orr, cientista de pesquisa sênior e líder de capacidade do EMSL CISA, o fluorescence SIM é um poderoso instrumento para o estudo da biologia celular molecular, incluindo microbiologia. Ele permite que os pesquisadores façam imagens ao vivo, células hidratadas intactas.

p "A beleza do SIM de fluorescência é que você está trabalhando com células em sua forma nativa, "disse Orr.

p "Um desafio científico atual em microscopia e imagem é fazer experimentos dinâmicos onde podemos observar coisas em tempo real e sob condições reais, "disse Dave Koppenaal, diretor de tecnologia da EMSL. "O SIM de fluorescência nos permite realizar experimentos in situ."

p O SIM de fluorescência usa corantes fluorescentes padrão e protocolos de coloração, ao contrário de alguns microscópios de fluorescência de super resolução que requerem moléculas fluorescentes específicas para manchar as amostras.

p "Você pode resolver informações espaciais com uma resolução de 100 nanômetros, o que você não pode fazer com outros microscópios de fluorescência, "disse Orr." Se você quiser estudar uma proteína específica em uma bactéria, você pode fazer aquela proteína brilhar em uma cor diferente e usar o sistema de imagem de super resolução para identificar o padrão de expressão espacial e temporal da proteína em relação a outras moléculas e estruturas celulares para obter uma melhor compreensão da função dessa proteína. "

p O SIM de fluorescência aprimora muito os recursos de biologia existentes do EMSL. O instrumento ajudará os pesquisadores a explorar questões sobre bioenergia, bio-produção, reciclagem de carbono e outros processos envolvendo células vivas. O SIM de fluorescência será especialmente útil no estudo da biologia sintética, a concepção e construção de novas funções e sistemas biológicos não encontrados na natureza.

p "Existem apenas algumas técnicas de microscopia de super resolução, "disse Koppenaal." O SIM fluorescente é um dos mais novos, portanto, ainda não está amplamente disponível. Isso deve ter apelo tanto para a equipe do PNNL quanto para os usuários do EMSL, porque é um instrumento bastante único. A EMSL tem o orgulho de administrar essa capacidade. "