Esquema da imagem da estrutura 3D do tecido patológico combinando tomografia de difração óptica e costura automatizada. Crédito:Hugonnet et al., doi 10.1117 / 1.AP.3.2.026004
Histologia é o estudo de tecidos biológicos em um nível microscópico. Também chamada de anatomia microscópica, a histologia é amplamente utilizada para fornecer diagnóstico de câncer e outras doenças. Por exemplo, as amostras de tecido obtidas durante a cirurgia podem ajudar a determinar se uma ação cirúrgica adicional é necessária, e outras cirurgias podem ser evitadas se um diagnóstico puder ser obtido rapidamente durante uma operação.
Os métodos tradicionais em histopatologia são geralmente limitados a amostras finas e requerem processamento químico do tecido para fornecer contraste suficientemente alto para a imagem, o que retarda o processo. Um avanço recente na histopatologia elimina a necessidade de coloração química e permite imagens de alta resolução de seções de tecido espesso. Conforme relatado em Fotônica Avançada , uma equipe de pesquisa internacional demonstrou recentemente uma técnica de imagem de fase quantitativa sem rótulo 3D que usa tomografia de difração óptica para obter informações de imagem volumétrica. A costura automatizada simplifica a aquisição e análise de imagens.
Tomografia de difração óptica
A tomografia por difração óptica é uma técnica de microscopia para reconstruir o índice de refração de uma amostra de tecido a partir de suas imagens de campo dispersas obtidas com vários ângulos de iluminação. Ele permite a visualização de alto contraste sem rótulo de amostras transparentes. O campo espalhado complexo transmitido através da amostra é primeiro recuperado usando holografia fora do eixo, então, os campos dispersos obtidos com vários ângulos de iluminação são mapeados no espaço de Fourier, permitindo a reconstrução do índice de refração da amostra.
Histopatologia volumétrica de amostra de tecido pancreático não marcada com 100 μm de espessura de um paciente com neoplasia papilar intraductal do ducto biliar no fígado. Para efeito de comparação, os tecidos adjacentes foram preparados em lâminas de tecido fino com o método convencional de coloração H&E. (a quinta linha, Ampliação de 400x). Crédito:Hugonnet et al., doi 10.1117 / 1.AP.3.2.026004.
Uma limitação reconhecida da tomografia de difração óptica é devido à distribuição complexa dos índices de refração, o que resulta em aberração óptica significativa na imagem de tecido espesso. Para superar essa limitação, a equipe usou reorientação digital e costura automatizada, permitindo a imagem volumétrica de tecidos de 100 µm de espessura sobre um campo de visão lateral de 2 mm x 1,75 mm, mantendo uma alta resolução de 170 nm x 170 nm x 1400 nm. Eles demonstraram que a visualização simultânea de estruturas subcelulares e mesoscópicas em diferentes tecidos é possibilitada por alta resolução combinada com um amplo campo de visão.
Rápido, histopatologia precisa
Os pesquisadores demonstraram a capacidade de seu novo método por imagem de uma variedade de diferentes patologias de câncer:tumor neuroendócrino pancreático, neoplasia intraepitelial, e neoplasia papilar intraductal do ducto biliar. Eles fizeram imagens em escala milimétrica, imaculado, Tecidos de 100 μm de espessura em uma resolução 3D subcelular, que permitiu a visualização de células individuais e arquiteturas de tecidos multicelulares, comparáveis às imagens obtidas com tecidos tradicionais quimicamente processados. De acordo com o Parque YongKuen, pesquisador do Instituto Avançado de Ciência e Tecnologia da Coreia e autor sênior do estudo, "As imagens obtidas com o método proposto permitiram a visualização clara de diferentes características morfológicas nos vários tecidos permitindo o reconhecimento e diagnóstico de lesões precursoras e patologias."
Park observa que mais pesquisas são necessárias, mas os resultados sugerem um grande potencial para rápido, histopatologia precisa durante a cirurgia:"Mais pesquisas são necessárias sobre a preparação da amostra, velocidade de reconstrução, e mitigação de espalhamento múltiplo. Esperamos que a tomografia de difração óptica forneça diagnósticos mais rápidos e precisos em consultas de histopatologia e patologia intraoperatória. "