Um microbiologista usa coloração de quitina para que ela possa ver fungos claramente sob o microscópio. Os fungos usam a quitina como material estrutural em suas paredes celulares para que a mancha mostre bem a parede celular. A coloração de lactofenol algodão azul é a coloração mais comum para fungos. O fenol mata microorganismos e impede que as enzimas fúngicas quebrem a célula. O corante azul-algodão transforma o azul da quitina. Coloração de quitina é um procedimento relativamente simples com materiais baratos. Você pode fazer seu próprio corante ou comprar uma mancha comercialmente preparada.
Prepare uma solução de azul de algodão lactofenol. Pesar 0,05 gramas de corante azul de algodão usando uma balança sensível. Misture o corante com 20 mililitros de água destilada em um tubo de ensaio e deixe durante a noite.
Coloque as luvas antes de terminar a preparação das manchas no dia seguinte. Coloque 20 ml de ácido láctico num copo e misture com 20 g de cristais de fenol. Mexa até a mistura estar dissolvida. Adicione 40 ml de glicerol e misture. Em seguida, estique a solução de algodão azul através de um pedaço de papel de filtro no copo e misture bem.
Como alternativa, use uma fonte comercialmente preparada da mancha. Armazene a mancha à temperatura ambiente.
Etiquete uma lâmina de microscópio com o nome ou número de identificação da amostra. Use um conta-gotas estéril para colocar uma única gota de uma amostra de água no centro da lâmina do microscópio. Para uma amostra seca, coloque uma única gota de solução de álcool a 70 por cento na lâmina e, em seguida, use um laço estéril para misturar a amostra seca no álcool.
Use um conta-gotas para transferir duas gotas do lactofenol mancha de algodão azul no centro do slide. Se você estiver usando álcool a 70% no slide, faça isso antes que o álcool evapore do slide.
Toque em uma das bordas da lamínula do microscópio em uma borda da preparação de amostra úmida. Deixe o deslizamento cair suavemente sobre a preparação da amostra, garantindo que você não prenda nenhuma bolha de ar sob o slide. A amostra corada está agora pronta para ser examinada ao microscópio.
