As curvas de calibração são usadas para determinar a concentração de substâncias desconhecidas com base em medições anteriores de soluções de concentrações conhecidas. A precisão e exatidão das medições dependem da curva de calibração. Quanto melhor a curva, quanto mais precisa a resposta, pior a curva, pior a precisão. Este é um tipo de método de comparação, o desconhecido é comparado a um conhecido. As curvas de calibração são usadas para todos os tipos de medições usando várias máquinas diferentes. Este exemplo usa um espectrofotômetro.

Dilua a solução padrão para diferentes concentrações. É típico fazer uma diluição de 10 vezes, diluição de 20 vezes, diluição de 30 vezes ou alguma outra solução passo a passo. Faça cada diluição duas vezes para que todas as amostras estejam duplicadas.

Calcule as concentrações das soluções diluídas. Um exemplo da nova concentração para a diluição de 10 vezes seria a concentração da primeira solução multiplicada por 0,10.

Leia a absorvência das soluções diluídas no espectrofotômetro. Insira uma cubeta no espectrofotômetro para que a marcação do triângulo esteja alinhada com o caminho da luz. Feche a tampa do espectrofotômetro e pressione o botão zero. Zerar a máquina com água destilada a cada cinco amostras. Depois que a máquina for zerada, leia as amostras da mesma maneira. A única diferença é que você pressiona enter para obter a absorvência. Pressione enter depois de fechar a tampa. Registre esses valores em um caderno.

Represente graficamente a absorvência em relação às concentrações conhecidas calculadas para todas as amostras. A concentração conhecida será no eixo X e a absorvência no eixo Y. É melhor criar o gráfico em um programa de gráficos de computador.

Use o programa de gráficos para calcular a linha de regressão para os pontos representados graficamente. É possível excluir um dos dois pontos para cada diluição para obter a melhor linha de regressão. Este é o ponto de fazer cada diluição em duplicado. Quanto mais próximo o valor de R ^ 2 for de um, melhor será a linha de regressão. Anote a equação da linha de regressão.

Leia a absorvência da solução de concentração desconhecida no espectrofotômetro. Registre essa absorvência.

Calcule a concentração da solução desconhecida usando a equação da linha de regressão. A absorvência desconhecida é substituída como Y na equação. Você está resolvendo a equação de X, a concentração.