Fazer cópias de DNA requer enzimas chamadas DNA polimerases. Essas enzimas preservam um genoma durante a replicação. Antes da década de 1960, os cientistas não tinham uma DNA polimerase estável ao calor para fazer mais cópias de DNA. Em 1966, nas águas termais efervescentes do Parque Nacional de Yellowstone, nos EUA, Thomas D. Brock descobriu uma bactéria, chamada termófilo, que poderia sobreviver a temperaturas extremamente altas, e a denominou Thermus aquaticus. TL; DR (muito longo; não leu) Taq polimerase, a primeira polimerase de DNA estável ao calor para A PCR foi descoberta em 1966. A PCR transformou a amplificação de DNA, tornando o processo rápido e eficiente. Isso revolucionaria a clonagem, testes de DNA, análise forense e medicina. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi desenvolvida pelo químico Kary Mullis na década de 1980, como um meio de fazer muitas cópias de fragmentos de DNA. Os cientistas perceberam que seriam necessárias polimerases de DNA termoestáveis (estáveis ao calor) para que a PCR funcionasse com eficiência. Taq e polimerase, sendo termoestáveis, mostrou-se ideal para PCR. Na PCR, uma amostra de DNA é combinada com iniciadores, que são sequências de ácidos nucleicos que iniciam a síntese do DNA; Taq e polimerase; e trifosfatos de nucleotídeos (dNTPs). Esta mistura é colocada em tubos dentro de uma máquina de PCR automatizada. A combinação é aquecida a 94 graus Celsius, o que faz com que o DNA desnature ou desenrole, e se torna duas fitas de DNA de fita simples (ssDNA). A mistura é então resfriada a 55 graus C, altura em que os primers recozem na parte do DNA que precisa ser replicada. A combinação é aquecida novamente, mas a 72 graus C, que é a temperatura ideal para que a polimerase Taq e a polimerase usem os primers para criar novas fitas de DNA, e as reformas em hélice. Esse processo, que ocorre em minutos, é repetido várias vezes para criar milhões de cópias de pedaços de DNA. A Cetus Corporation desenvolveu uma máquina de termociclagem, ou termociclador, que acelerou o processo de aquecimento e resfriamento das amostras. Eventualmente, em vez de isolar Taq e polimerase de Thermus aquaticus A capacidade de usar um pequeno pedaço de DNA e copiá-lo milhões de vezes via PCR transformou a biologia molecular. Testar antecedentes genéticos e defeitos genéticos requer apenas uma pequena amostra, mas produz grandes quantidades de informações cruciais que auxiliam a medicina e a pesquisa ancestral. A PCR também foi usada para detectar o HIV em células humanas, abrindo o campo da epidemiologia para os benefícios da rápida amplificação do DNA. Os cientistas forenses usam regularmente a PCR, isolando evidências de DNA de fios de cabelo ou pequenas amostras de sangue e, assim, ajudando no combate ao crime. Até os fósseis podem produzir fragmentos de DNA que podem ser replicados muitas vezes, fornecendo informações sobre a evolução. O poder da polimerase Taq e estável ao calor levou a um vasto e inestimável avanço na ciência.
A polimerase deste organismo foi denominada Taq e polimerase.
Reação em cadeia da polimerase (PCR)
células, o gene pol
dessa bactéria foi isolado e clonado para produzir seu genoma em células Escherichia e coli (E. coli). Enquanto novas polimerases de DNA termoestáveis foram descobertas, Taq e polimerase continuam sendo o padrão para PCR.
Uma revolução na biologia molecular