Os microbiologistas estudam as características de microorganismos como algas, protozoários, bactérias, fungos e vírus usando um microscópio. Enquanto alguns organismos, como os protozoários e as células de levedura, são fáceis de observar usando uma montagem úmida, as células bacterianas exigem coloração. Os cientistas desenvolveram vários métodos, como coloração de Gram, coloração ácido-rápida e coloração fluorescente para melhor visualização das células bacterianas e estruturas celulares. Usando esses métodos de coloração, é possível identificar características estruturais que ajudam a classificar as bactérias.

Melhor visualização

Os organismos bacterianos são tão pequenos que a maioria deles é visível apenas sob um microscópio com um poder de ampliação. de 1000X. No entanto, a mera ampliação do tamanho não fornece um grau suficiente de clareza, de modo que as bactérias devem, portanto, ser coradas antes da observação para fornecer a clareza necessária para a visualização.

Identificação e Classificação

distinguir entre tipos bacterianos é conhecido como coloração diferencial. A coloração de Gram é uma dessas manchas diferenciais que distingue entre as bactérias com base no seu conteúdo na parede celular. Neste método, as células bacterianas reagem com uma mancha de violeta de cristal para assumir uma cor violeta. Ao adicionar um agente de eliminação de manchas, algumas células bacterianas perdem cor, enquanto outras não. Ao adicionar a mancha de safranina, as células descoradas assumem a cor vermelha, enquanto as células bacterianas que não perderam a cor permanecem violetas. As células bacterianas que assumem a cor vermelha são chamadas de organismos Gram-negativos e aquelas que não assumem a cor são classificadas como organismos Gram-positivos. A coloração de Gram fornece um método rápido para a identificação inicial de bactérias envolvidas em infecções. Da mesma forma, o procedimento de coloração ácido-rápida ajuda a identificar especificamente os organismos pertencentes à classe de bactérias chamada Mycobacteria, como Mycobacterium tuberculosis.

Detecção de Viabilidade

Em espécimes de cultura bacteriana, é muitas vezes importante para detectar a presença de células bacterianas vivas. Os métodos de coloração, como a coloração fluorescente, ajudam a identificar se as células da cultura são viáveis ​​ou não. As bactérias vivas têm a capacidade de converter o corante de 5-ciano-2,3-ditolil-cloreto de tetrazólio (CTC) num corante que apresenta uma fluorescência vermelha. Portanto, quando as culturas coradas com CTC emitem tal fluorescência, indica a presença de bactérias viáveis. O iodeto de propídio é uma mancha que age apenas em células não vivas que possuem membranas danificadas e, portanto, é útil na identificação de células bacterianas mortas.

Identificação de estruturas celulares

A coloração fornece um método de visualizando claramente várias estruturas celulares. Por exemplo, o método de coloração de Fuelgen permite a identificação do núcleo dentro de células bacterianas, enquanto a mancha de Albert é útil na visualização de grânulos metacromáticos. Da mesma forma, a técnica de impregnação de prata permite a identificação de espiroquetas. Os flagelos são fáceis de observar quando manchados com a mancha de Ryu. A coloração verde da malaquita ajuda a identificar os esporos bacterianos.