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    Novo método de triagem de alto rendimento desenvolvido para cetonas

    Fluxograma da triagem de fluorescência de PMA-cetona. Crédito:Grupo do Prof. SUN Zhoutong

    As cetonas são de grande importância como blocos de construção na química orgânica sintética e na biocatálise. A maioria das cetonas não pode ser analisada quantitativamente facilmente devido à falta de propriedades fotométricas visíveis. O desenvolvimento de um ensaio de alto rendimento (HTA) eficaz é, portanto, necessário para a determinação de cetonas.

    O grupo do Prof. Sun Zhoutong do Instituto Tianjin de Biologia Industrial da Academia Chinesa de Ciências desenvolveu um método colorimétrico para detectar rapidamente cetonas estruturalmente diversas usando parametoxi-2-amino benzamidoxima (PMA) como uma sonda química.

    O sistema baseado em PMA permite a triagem de fluorescência que é bastante sensível (faixa de até μM), compatível com sistemas aquosos e ampla faixa de pH. Várias cetonas podem ser usadas, especialmente aqueles com substituintes ricos em elétrons e estericamente pequenos. O ensaio fácil de operar pode ser conduzido em um formato de placa de 96 poços em temperatura ambiente com equipamento normal de laboratório.

    Além disso, o ensaio de alto rendimento (HTA) desenvolvido foi empregado com sucesso na descoberta baseada em mineração de enzimas com atividade de oxidação aumentada para álcoois secundários e na evolução direcionada de uma desidrogenase de álcool destinada a aumentar a atividade catalítica usando cetonas como substratos ou produtos.

    Este trabalho fornece uma ferramenta geral para detecção de cetonas no desenvolvimento de biocatalisadores.

    O estudo, intitulado "Um ensaio de fluorescência de alto rendimento para detecção de cetonas e suas aplicações em mineração de enzimas e engenharia de proteínas, "foi publicado em ACS Omega .


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