p (PhysOrg.com) - A imagem de células vivas em nível molecular mal era um sonho há vinte anos. Hoje, Contudo, este sonho está perto de se tornar realidade. p No Instituto Max Planck de NanoBiofotônica em Göttingen, Stefan Hell (ganhador do Prêmio Otto Hahn em 2009) desenvolveu métodos de microscopia de fluorescência para observar objetos em nanoescala e com seus colegas Vladimir Belov e Christian Eggeling uma nova série de corantes fotoestáveis ​​que podem ser usados ​​como marcadores fluorescentes foi realizada. conforme relatado em uma história de capa em Química - Um Jornal Europeu .

p Nas últimas duas décadas, Stefan Hell e seu grupo revolucionaram a arte da microscopia além dos limites considerados inquebráveis. Devido às propriedades de onda (difração) da luz, a resolução de um microscópio óptico é limitada a detalhes do objeto de cerca de 0,2 micrômetros. As leis da física pareciam proibir detalhes de imagem além desse limite. Stefan Hell viu além desta limitação e cerca de quinze anos atrás sua visão tornou-se concreta; ele desenvolveu um método para observar objetos na escala nanométrica, desligando sequencialmente a fluorescência das moléculas próximas por emissão estimulada, uma técnica conhecida como nanoscopia STED.

p A sensibilidade desta técnica depende do brilho dos marcadores de fluorescência aplicados e sua fotoestabilidade também é de grande importância. O grupo NanoBiophotonics conseguiu sintetizar uma série de corantes altamente fotoestáveis ​​e altamente fluorescentes. Esses compostos emitem luz verde e laranja e são baseados em derivados de flúor do conhecido corante Rodamina. O uso desses corantes na nanoscopia STED leva a imagens de alta qualidade no que diz respeito ao brilho e à relação sinal-fundo; além disso, a resolução em relação aos microscópios ópticos mais tradicionais é significativamente melhorada, fornecendo informações estruturais mais detalhadas.

p Esses derivados de flúor à base de rodamina são ainda mais especiais devido à sua versatilidade. Os compostos estão disponíveis nas formas hidrofílica e lipofílica, e com a inclusão de grupos amino reativos, eles podem ser facilmente anexados a anticorpos ou outras biomoléculas no decurso de procedimentos de marcação e imunocoloração padrão. O grupo demonstra que esses novos corantes são capazes de atravessar as membranas celulares e atingir o interior das células vivas, o que poderia levar a novas estratégias de rotulagem para sistemas biológicos. Todos os olhos estão agora em Göttingen para ver até onde a nanoscopia óptica pode ir.