O microscópio de luz é uma ferramenta essencial do bacteriologista. As bactérias são simplesmente pequenas demais para serem vistas sem ajuda. Algumas bactérias são tão pequenas, de fato, que nem podem ser vistas com um poderoso microscópio de luz sem uma pequena ajuda - uma pequena ajuda na forma de uma lente de imersão em óleo. As lentes que requerem imersão em óleo são todas classificadas como objetivos de alta ampliação.

Ampliação do Olho

Seu olho contém superfícies que dobram a luz para trazê-lo para se concentrar em sua retina. A posição de um ponto de luz na sua retina depende do ângulo em que a luz entra no seu olho. Seu olho focaliza a luz de dois ângulos diferentes em dois pontos diferentes. A separação dos pontos depende da diferença no ângulo. Se dois pontos estiverem próximos o suficiente para estimular as mesmas células na sua retina, você não conseguirá diferenciá-los. É por isso que você não consegue ver bactérias: o ângulo entre a luz vinda dos dois lados de uma bactéria é tão pequeno que o olho se mistura com outra luz.

Como funciona um microscópio

Um microscópio é como uma lente extra na frente do olho. Todo o propósito é ampliar o ângulo de luz proveniente de um objeto, de modo que o microscópio atua como uma grande lupa, curvando a luz para que pareça que o objeto está espalhado. Mas usar uma lente grande para o trabalho criaria imagens escuras e distorcidas, de modo que um microscópio usa duas lentes pequenas: um objetivo próximo à amostra e uma ocular, ou ocular, próxima ao olho. Cada uma dessas lentes tem sua própria ampliação. A ampliação de todo o microscópio é o produto da ampliação de ambas as lentes. Uma ocular 10X - uma que amplia por um fator de 10 - com uma objetiva de 20X dá uma ampliação geral de 200X.

Luz de flexão

A luz se dobra quando transita de uma superfície para outra . Duas coisas são necessárias: a luz precisa atingir a interface em um ângulo, e a "densidade" dos dois materiais precisa ser diferente. Isso não é, na verdade, densidade por peso, mas um tipo de densidade óptica chamado índice de refração.

Quanto maior a ampliação, maior o ângulo de luz que o objetivo deve coletar da amostra. Normalmente, as bactérias estão em uma gota de água contida em uma lâmina de vidro, e a luz se dobra quando sai da lâmina. Isso tem o efeito de fazer um cone de luz proveniente da bactéria se espalhar para um cone ainda maior. Em altas ampliações, o cone de luz deve ficar grande - tão grande que pode perder totalmente a lente. É aí que entra a imersão em óleo.

Lentes de imersão em óleo

O cone de luz de uma lâmina de vidro se espalha por dois motivos: porque está em um ângulo em relação à superfície e porque o índice de a refração do ar é menor que o índice de refração do vidro. O óleo tem o mesmo índice de refração que o vidro, então o cone de luz não se espalha muito. Em vez disso, a luz permanece no mesmo ângulo até atingir a lente objetiva.

A lente objetiva deve ser especialmente projetada para se concentrar em uma amostra através do óleo, mas muitas lentes são projetadas dessa maneira. Geralmente, lentes objetivas de 60X ou superiores podem usar óleo - e certamente atingirão o limite de 100X. Porque as oculares são tipicamente 10X, o óleo é necessário para a visualização de bactérias com uma ampliação de 1000X.