p miniLM. Crédito:The Francis Crick Institute
p Nenhum microscópio pode obter imagens de todos os aspectos de uma amostra ao mesmo tempo e, portanto, o uso de dois ou mais métodos de imagem para estudar uma amostra - imagem correlativa - é comum. p Lucy Collinson lidera a Plataforma de Tecnologia Científica de Microscopia Eletrônica do Instituto Francis Crick. A plataforma oferece experiência em imagens de estruturas de moléculas, células e tecidos em alta resolução.
p A imagem correlativa permitiu aos pesquisadores de Crick trabalhar em colaboração com a equipe de Lucy para estudar como as sinapses no cérebro se formam, os primeiros processos de produção de proteínas de coagulação do sangue e como as partículas de HIV são liberadas das células infectadas.
p Agora, colaborando com fabricantes de instrumentos, A equipe de Lucy levou a tecnologia um passo adiante.
p Eles desenvolveram uma nova maneira de criar estruturas de imagem que supera as limitações da tecnologia existente. Eles fizeram isso colocando um microscópio de luz fluorescente dentro de um microscópio eletrônico.
p "Um grande desafio na imagem correlativa é preparar a amostra de uma forma que possa ser visualizada no microscópio óptico e eletrônico, "explica Lucy." Desenvolvemos um protocolo que preserva as proteínas fluorescentes que se iluminam ao microscópio de luz, enquanto tinge e incorpora a amostra para que as células possam ser vistas no microscópio eletrônico e resistam ao ambiente de vácuo. Isso nos permite obter a imagem das amostras em uma máquina - um microscópio integrado de luz e elétron. "
p ultraLM. Crédito:The Francis Crick Institute
p A imagem de uma amostra dessa forma revela a função dinâmica das proteínas (revelada pelo microscópio de luz) dentro do contexto da estrutura celular e do tecido (mostrada em grande detalhe pelo microscópio eletrônico).
p Martin Jones e Lizzy Brama, dois físicos do grupo de Prototipagem de Microscopia, projetou e construiu um 'miniLM, 'semelhante em conceito aos sistemas de endoscopia de fluorescência usados em cirurgia guiada por fluorescência.
p Eles também projetaram um segundo sistema, o 'ultraLM, 'que auxilia na preparação de amostras das células embutidas em resina fluorescente na ferramenta de ultramicrótomo que corta as amostras em seções.
p O trabalho de desenvolvimento ocorreu no Crick, com a ideia de que deveria ser disponibilizado para a comunidade como tecnologia de código aberto. O objetivo é qualquer instalação que tenha as habilidades necessárias para construir e adaptar esses microscópios de fluorescência miniaturizados em seus próprios microscópios eletrônicos. Também há planos de licenciar a tecnologia para fabricantes comerciais.