Bioquímica estuda moléculas como DNA, RNA e proteínas. Técnicas de blotting são o que os cientistas usam para separar esses tipos de moléculas. Nas células, elas existem como uma mistura. Blotting permite aos pesquisadores encontrar uma proteína entre muitas, como uma agulha no palheiro. O blotting é geralmente feito deixando uma mistura de DNA, RNA ou proteína fluir através de uma placa de gel. Este gel permite que pequenas moléculas se movam mais rápido que as maiores. As moléculas separadas são então pressionadas contra uma membrana, o que ajuda a mover as moléculas do gel para a membrana. As moléculas aderem à membrana, mas permanecem no mesmo local, separadas umas das outras, como se ainda estivessem no gel.

Western Blot

Western blotting é uma técnica comum para separar proteínas por tamanho, mas em colunas retas. Essas colunas paralelas permitem que os pesquisadores comparem a quantidade de uma proteína em diferentes amostras que são executadas ao lado uma da outra, como pistas de boliche. Por exemplo, se você estivesse testando o efeito de diferentes quantidades de uma droga no crescimento celular, você trataria quatro grupos diferentes de células com uma quantidade diferente de droga. Então você poderia quebrar as células abertas e executar as proteínas de cada grupo em faixas separadas em um gel. Espalhar as proteínas dessa maneira permite que você veja o que uma concentração crescente de drogas faz com uma determinada proteína.

Northern Blot

O Northern blotting é usado para detectar RNA. As células podem ser quebradas para liberar seu RNA. O RNA de diferentes tipos de células pode ser executado em pistas separadas em um gel. O gel espalha os diferentes RNA por tamanho. Essas fileiras paralelas e perfeitas de RNA permitem que um pesquisador compare qual tipo de célula tem o quanto de qual RNA. Esse método permite que um pesquisador determine se as células de uma determinada doença têm mais RNA ou menos desse RNA. Northern blotting pode revelar como uma doença está funcionando no nível de produção de RNA.

Southern Blot

Southern blotting é a técnica original de blotting, que iniciou o sistema de nomeação. Foi inventado por Edwin Southern. O Southern blot é usado para detectar a quantidade de DNA em uma mistura. Assim como com a proteína e o RNA, o DNA de uma célula pode ser liberado quando essa célula é quebrada. Southern blotting separa DNA de diferentes tipos de células por tamanho. O DNA de cada amostra é espalhado em faixas paralelas e limpas. Pedaços individuais de DNA podem ser detectados usando uma sonda radioativa ou fluorescente, que é projetada para se ligar apenas a esse pedaço de DNA. O sinal de energia de uma sonda radioativa, ou os flashes de luz de um sinal fluorescente, informam aos pesquisadores quanto desse pedaço de DNA está em cada amostra.

Outros Manchas

Os três principais blotting técnicas - ocidental, norte e sul - foram modificadas de diferentes maneiras para detectar moléculas ligeiramente diferentes. Cada técnica modificada é geralmente feita da maneira usual, mas usa um método diferente para detectar a molécula que está sendo espalhada nas faixas paralelas. Os borrões do sudoeste detectam moléculas de proteína presas ao DNA. Os borrões do noroeste detectam moléculas de proteína presas ao RNA. Os borrões de Farwestern detectam moléculas de proteína presas a outras proteínas.