Quando você muda de baixa potência para alta potência em um microscópio, a lente objetiva de alta potência se move diretamente sobre a amostra e a objetiva de baixa potência a lente gira longe da amostra. Essa alteração altera a ampliação de uma amostra, a intensidade da luz, a área do campo de visão, a profundidade de campo, a distância de trabalho e a resolução. A imagem deve permanecer em foco se as lentes forem de alta qualidade.
Mudança na ampliação
Mudar de baixa potência para alta aumenta a ampliação de uma amostra. A quantidade que uma imagem é ampliada é igual à ampliação da lente ocular, ou ocular, multiplicada pela ampliação da lente objetiva. Normalmente, a lente ocular tem uma ampliação de 10x. Um microscópio óptico padrão de qualidade de laboratório típico normalmente tem quatro lentes objetivas, que vão de uma baixa potência de 4x a uma alta potência de 100x. Com uma potência ocular de 10x, isso dá ao microscópio óptico padrão uma ampliação geral de 40x a 1000x.
Intensidade da luz diminui
A intensidade da luz diminui à medida que a ampliação aumenta. Há uma quantidade fixa de luz por área e, quando você aumenta a ampliação de uma área, observa uma área menor. Então você vê menos luz, e a imagem parece mais fraca. O brilho da imagem é inversamente proporcional à ampliação ao quadrado. Dado um aumento de quatro vezes na ampliação, a imagem será 16 vezes dimmer.
Campo de Visão
Ir para alta potência em um microscópio diminui a área do campo de visão. O campo de visão é inversamente proporcional à ampliação da lente objetiva. Por exemplo, se o diâmetro do seu campo de visão for 1,78 milímetros com aumento de 10x, um objetivo de 40x será um quarto da largura, ou cerca de 0,45 milímetros. A amostra parece maior com uma ampliação maior porque uma área menor do objeto é espalhada para cobrir o campo de visão de seu olho.
Profundidade de campo
A profundidade de campo é uma medida da espessura de um plano de foco. À medida que a ampliação aumenta, a profundidade de campo diminui. Com baixa ampliação, você pode ver o volume inteiro de um paramécio, por exemplo, mas quando você aumenta a ampliação, pode ver apenas uma superfície do protozoário.
Distância de trabalho
A distância de trabalho é a distância entre a amostra e a objetiva. A distância de trabalho diminui à medida que você aumenta a ampliação. A lente objetiva de alta potência precisa estar muito mais próxima da amostra do que a lente objetiva de baixa potência para se concentrar. A distância de trabalho é inversamente proporcional à ampliação.
Imersão em óleo
Os microscópios ampliam a aparência de um objeto ao dobrar a luz. Maior ampliação significa que a luz está mais torta. Em um certo ponto, a luz é tão torta que não consegue passar pela lente objetiva. Nesse ponto - geralmente em torno de 100x para microscópios de laboratório padrão - você precisará colocar uma gota de óleo entre a amostra e a lente objetiva. O óleo "desenrola" a luz para esticar a distância de trabalho e possibilitar a imagem em altas ampliações.
