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    Como medir a temperatura ideal para uma enzima

    Uma enzima é uma proteína que catalisa (aumenta a taxa de) reações químicas. A temperatura ideal da maioria das enzimas, ou a temperatura na qual as enzimas melhor facilitam as reações, é entre 35 e 40 graus Celsius. O aumento da temperatura dentro dessa janela aumenta a taxa de reação, porque estimula as moléculas e aumenta a taxa na qual as enzimas /reagentes colidem e reagem para produzir o produto. No entanto, o aumento excessivo da temperatura pode desnaturar a enzima e impedir que ela funcione.

    Determine a temperatura ótima da enzima aquecendo a reação em quantidades infinitesmais e tomando pequenas amostras da reação, para determinar quando a taxa máxima de produzindo produto ocorre.

    Selecione um método. Determine como você vai medir a concentração do seu produto em vários pontos do experimento. Por exemplo, você pode medir a concentração de muitos produtos usando um espectrofotômetro e calcular a concentração a partir da absorbância, ou medir a fluorescência e calcular a concentração da fluorescência.

    Configure sua experiência. Coloque seus reagentes e enzimas em um pequeno recipiente com tampa, como um frasco de cintilação. A reação começará. Coloque o frasco de cintilação em um copo grande de água à temperatura ambiente. Coloque o copo em uma placa de aquecimento. Coloque um termômetro dentro do béquer. Isso permite que você meça a temperatura da reação em vários pontos.

    Pegue uma amostra de 100 microlitros da reação à temperatura ambiente, cerca de 25 graus Celsius. Ligue a placa de aquecimento. Em várias temperaturas entre 30 e 40 graus Celsius (30,5, 31, 31,5, etc.), obtenha 100 microlitros de sua reação.

    Determine a concentração do seu produto em cada temperatura. Quando a temperatura subir acima de 40 graus Celsius, você verá uma diminuição na taxa na qual o substrato é convertido em produto, porque a enzima é desnaturada. O ponto em que o produto está sendo produzido na taxa máxima é o ponto em que a temperatura está em seu nível ótimo.

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