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    Janela de compensação óptica não invasiva do crânio para imagens corticais

    O diagrama esquemático e o desempenho da técnica da janela de compensação óptica do crânio (SOCW). (a) Quatro etapas:imobilização, clareira ótica do crânio, imagem cortical, e recuperação. (b) Um dispositivo de imobilização de cabeça customizado consistindo em um porta-crânio e uma placa customizada é usado para reduzir o artefato de movimento durante a imagem. (c) Estrutura anatômica do crânio do camundongo. (d) Esquema do SOCW. Uma camada de plástico é colocada sobre o crânio limpo para separar a objetiva de imersão em água do agente de clareamento óptico (OCA). (e) Imagens de fluorescência representativas dos dendritos através do crânio, antes e depois da compensação óptica do crânio. Descobrimos que a qualidade da imagem melhorou consideravelmente e que era suficiente para obter imagens das espinhas dendríticas através do crânio limpo. (f) A profundidade de imagem através do SOCW. Projeções ortogonais (x-z) de dendritos, antes e depois da clareira ótica do crânio, demonstrando que a profundidade aumenta obviamente após a limpeza (o parâmetro de imagem e o processamento de dados eram os mesmos). (g-h) A repetibilidade da técnica SOCW. Imagens repetidas dos dendritos (g) e espinhas (h) dos neurônios Thy1-YFP obtidas ao longo do intervalo de 1 d. Barra de escala, 10 μm. Crédito:Janela de compensação ótica do crânio para imagens in vivo do córtex do mouse em resolução sináptica. Yan-Jie Zhao, Ting-Ting Yu, Chao Zhang, Zhao Li, Qing-Ming Luo, Tong-Hui Xu e Dan Zhu. Light:Ciência e Aplicações volume 7, página 17153 (2018) doi:10.1038 / lsa.2017.153

    Os pesquisadores demonstraram uma abordagem não invasiva para a criação de uma janela ótica nos crânios de ratos para obter imagens de seus cérebros. Prof. Dan Zhu e colegas de trabalho da Universidade Huazhong de Ciência e Tecnologia, China, testaram o uso de agentes clareadores ópticos (OCAs) que eles aplicaram no crânio nu (cabelo e pele removidos) de camundongos vivos. Após o tratamento com OCAs, o crânio fica transparente em minutos, formando assim uma janela visível para o córtex. Combinado com microscopia de dois fótons, esta técnica permite imagens das estruturas finas dos neurônios, glia e a microvasculatura no cérebro do rato. Devido ao seu fácil manuseio, segurança, repetibilidade e excelente desempenho, este método é promissor na pesquisa em neurociência. A pesquisa foi publicada em jornal Luz:Ciência e Aplicações .

    A observação e a manipulação de células no córtex são críticas para os estudos da estrutura e função do cérebro. Contudo, o forte espalhamento causado pelo crânio sobre o córtex limita a profundidade de penetração da luz nos tecidos, e, portanto, impede a observação de estruturas neuronais marcadas com fluorescência e microvasculatura. Para superar esse obstáculo, pesquisador desenvolveu vários métodos de janela craniana, incluindo a janela de vidro de caveira aberta, a janela craniana do crânio estreito, e variantes. Mas esses métodos apresentam limitações. A técnica de limpeza óptica do tecido pode reduzir a dispersão dos tecidos, que se tornou uma importante ferramenta para as aplicações da imagem óptica na pesquisa biomédica. Contudo, o método de compensação óptica atual é amplamente utilizado em estudos ex vivo de tecidos e órgãos, e há poucos estudos sobre como tornar transparentes os tecidos vivos.

    O Prof. Dan Zhu propôs inicialmente o estudo da técnica de compensação óptica in vivo. Na fase inicial, ela estava focada em pesquisar diferentes tipos de tecido da pele. Prof. Tonghui Xu, Colega do Prof. Dan Zhu, tem se empenhado na pesquisa de neuroimagem cortical em camundongos, e para imagens corticais in vivo, o crânio turvo torna-se um grande gargalo. Depois de se comunicar com o Prof. Tonghui Xu, O Prof. Dan Zhu começou a pesquisar a limpeza óptica do tecido do crânio. Após seis anos de trabalho árduo, eles desenvolveram um eficaz, janela de compensação óptica segura e comutável do crânio. Através desta janela, o contraste e a profundidade da imagem são significativamente melhorados, e as estruturas corticais podem ser visualizadas na resolução sináptica. Essa técnica é uma grande promessa para estudos da estrutura e função do cérebro em estados fisiológicos ou de doença.

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