Embora não possam ser vistas a olho nu, as bactérias estão em toda parte. Eles existem em comida, solo, água, superfícies dentro de nossas casas e dentro e sobre nossos corpos. Bactérias geralmente existem em populações mistas. O isolamento de uma bactéria específica de outras espécies bacterianas em uma dada amostra permite que os microbiologistas estudem sua estrutura e função, características utilizadas em sua identificação. Os microbiologistas frequentemente isolam bactérias usando uma das várias técnicas de placas em faixas.

Ferramentas

Uma alça de inoculação é usada para transferir microorganismos. Consiste em um fio de nicromo ou platina com um pequeno laço circular em uma extremidade. A outra extremidade é reta e desliza em uma alça. Laços de inoculação descartáveis ​​de plástico também estão disponíveis. Bactérias só podem ser isoladas se crescerem. Os microbiologistas cultivam bactérias para o isolamento das placas em placas de Petri rasas e redondas, cheias de um meio sólido, chamado ágar. O ágar imita o ambiente em que as bactérias crescem naturalmente. As placas cheias de mídia são estéreis e tampas para evitar o crescimento de organismos indesejáveis. Durante o isolamento da placa de linha, a alça de inoculação é repetidamente esterilizada na chama de um bico de Bunsen.

Princípio da

A técnica de placa de linha é o método mais popular para isolar bactérias específicas de uma amostra contendo um mistura de microorganismos. A técnica basicamente dilui o número de organismos e reduz sua densidade. Permite aos microbiologistas distinguir e isolar colônias bacterianas individuais. Uma colônia é um aglomerado visível de bactérias. Todas as bactérias em uma única colônia se originam da mesma célula bacteriana. Consequentemente, colônias individuais são colônias “puras”. A colônia pura é transferida para outra placa para produzir uma cultura pura que consiste em um tipo de bactéria.

Procedimento

Quando feito corretamente, o isolamento da placa de corte dilui uma amostra e permite que as células bacterianas individuais desenvolver em colônias isoladas. Um microbiologista começa por esterilizar a alça de inoculação em uma chama. Ela resfria o loop tocando no ágar, mergulha o loop na amostra e o espalha para trás e para frente para cobrir uma parte do prato. Ela esteriliza o laço, refrigera e inocula uma segunda seção adjacente da placa, arrastando o laço pela primeira seção várias vezes e cobrindo a segunda seção usando um movimento em ziguezague. Isso pega um pequeno número de bactérias da primeira seção e as transfere para a segunda seção. O número de vezes que este procedimento básico é repetido depende do método da placa em linha utilizado. Apesar do método, a amostra original é usada para inocular apenas a primeira seção da placa.
Métodos Métodos de placas de linha variam de acordo com o número de seções de ágar semeadas. O método T-streak usa três seções: a metade superior e duas seções inferiores de tamanhos iguais. O inóculo inicial é colocado na metade superior da placa. As bactérias são arrastadas da seção superior para uma das seções inferiores, depois daquela seção inferior para a outra. No método do quadrante, quatro seções de tamanhos iguais são listradas. O método de traçado contínuo normalmente envolve a inoculação da metade superior da placa, girando-a 180 graus e inoculando a outra metade da placa sem esterilizar o laço ou arrastar as bactérias da seção anterior.