Por que o sal de sulfato de amônio utiliza principalmente a precipitação de proteínas?
O sulfato de amônio ((NH₄) ₂so₄) é um reagente amplamente utilizado para a precipitação de proteínas devido às suas propriedades únicas que o tornam eficaz e eficiente:
1. Alta solubilidade: O sulfato de amônio é altamente solúvel em água, permitindo a criação de soluções concentradas. Essa alta solubilidade permite a adição de grandes quantidades de sal a uma solução proteica, aumentando a força iônica e promovendo a precipitação de proteínas.
2. Efeito de salga: O sulfato de amônio exibe um forte efeito de "salga". Isso significa que interrompe a concha de hidratação em torno das proteínas, reduzindo sua solubilidade e forçando -as a precipitar a partir da solução. O princípio por trás desse efeito é que os íons salgados competem com as moléculas de proteína para moléculas de água, levando à agregação e precipitação de proteínas.
3. Precipitação seletiva: Ao controlar cuidadosamente a concentração de sulfato de amônio, pode -se precipitar seletivamente diferentes proteínas com base em suas propriedades individuais de solubilidade. Isso permite a separação de proteínas com base em seu tamanho, carga e hidrofobicidade.
4. Precipitação suave: A precipitação de sulfato de amônio é geralmente considerada um método relativamente suave em comparação com outras técnicas de precipitação, como o uso de solventes orgânicos. Isso o torna adequado para preservar a integridade e a atividade das proteínas.
5. Facilidade de uso: O sulfato de amônio está prontamente disponível, barato e fácil de usar. Também é facilmente removido da proteína precipitada por diálise ou outros métodos, tornando -a uma escolha conveniente para a purificação de proteínas.
6. Estabilização de proteínas: Curiosamente, em baixas concentrações, o sulfato de amônio pode realmente aumentar a estabilidade da proteína, promovendo a dobragem de proteínas e reduzindo a agregação.
7. Aplicabilidade ampla: A precipitação de sulfato de amônio é uma técnica versátil aplicável a uma ampla gama de proteínas, de pequenas enzimas a grandes anticorpos.
No entanto, existem algumas limitações: *
Altas concentrações de sal podem ser prejudiciais para algumas proteínas. *
O método pode não ser adequado para todas as proteínas, particularmente aquelas com solubilidade muito baixa ou alta sensibilidade ao sal. No geral, a alta solubilidade do sulfato de amônio, efeito de salga, seletividade, gentileza, facilidade de uso e ampla aplicabilidade o tornam um reagente altamente eficaz e comumente usado para precipitação e purificação de proteínas.